Как нарисовать волка для детей карандашом поэтапно
Ну что, зайчики да ежики, расслабились от хорошей жизни? Трескаем морковку и зарядку не делаем? Ничего-ничего, щас придет дядя волк и наглядно разъяснит, что такое борьба за выживание и чем занимаются санитары леса Сегодня нарисуем волка!
Рисуем вот такую разомкнутую каплю – это будет контур морды:
Примерно на треть от низа рисуем нос (обратите внимание – сплющенный, но теперь вертикальный!) и проводим от него линию до нижнего края (морда у нас чуть наклонена, поэтому и линия должна быть не совсем прямая, а чуть по дуге):
Зубы! Два клыка торчат, остальные в засаде:
Усы. Волк у нас мужчина серьезный, ему с усами возиться некогда, поэтому они не такие длинные, как у кота:
Глаза: на этот раз, в отличие от всех предыдущих, они не в виде черточек. Рисуем два овала со зрачками (точками или черточками):
А прямо из глаз у волка растут уши. С точки зрения анатомии объяснить этот факт невозможно, конечно, да и бог с ним. Уши размером примерно как глаза:
Смотрите, морда готова, но волк у нас ни разу не злой. Наоборот – похож на растерянного ослика, у которого выросли клыки и он не знает, что с ними делать. Рассердить волка нам помогут брови. Берем и прямо поверх глаз рисуем закорюку – что-то среднее между V и U. Давайте-давайте, рисуйте пожирнее:
Думаю, каждый встречал начальников, похожих на нашего волка: сердитых и с черными мохнатыми бровями, да еще и с усами а-ля зубная щетка сорок пятого калибра. «Товарищ генерал, у вас внук родился, вылитый вы: маленький, лысый, нифига не понимает и все время орет» Так, вернемся к волку! рисуем тело…
…и руки. Не забудьте длинные когти!
Получился злобный неваляшка. Нарисуем ему ноги – такие же, как руки:
Пузико:
И хвост-веретено:
Обозначим кончик хвоста зигзагом… …и злой и страшный серый волк готов! В заключение – две маленькие подсказки: — нос смотрится живее, если закрашивать его не целиком, а оставить маленькую белую черточку или точечку – выглядит как блик — не жалейте лап! В смысле, рисуйте волку достаточно большие лапы. Ему пригодятся. Ну вот и все на сегодня. Кстати, вы не забыли, что мы решили дополнять рисунки? Так что наденьте на волка что-нибудь или в лапы чего-нибудь дайте. А слабо волка и трех поросят нарисовать? 🙂
Рисуем вспомогательные линии для первого волка. Строим две окружности. Одну для головы, а вторую – для туловища.
Дорисовываем щеки и ушки.
Изображаем уши, глаза, рот и нос.
Займемся передней частью туловища и передними лапами.
Рисуем выгнутую спину, задние лапы и хвост.
Переходим ко второму волку. Рисуем его морду с ушами, пастью и носом.
Заканчиваем второго волка – рисуем туловище, лапы и хвост.
Удаляем вспомогательные линии с рисунка и переходим к раскрашиванию.
Как нарисовать волка?
Рисовать любят практически все дети и многие взрослые. Уже приблизительно с годовалого возраста кроха не выпускает из рук карандаш и изображает свои первые рисунки везде, где это только возможно. Со временем эти схематичные картинки начнут приобретать форму, и малыш научится рисовать первые картинки – самого себя, своих родителей, сказочных и мультяшных персонажей, а также различных животных.Одним из самых популярных и любимых детьми разного возраста зверей является волк. Это животное нередко становится персонажем популярных сказок и разнообразных мультфильмов, поэтому многие ребята могут захотеть самостоятельно изобразить своего любимого героя. В данной статье мы расскажем вам, как просто и быстро нарисовать волка ребенку.
Как поэтапно нарисовать волка для детей карандашом?
При помощи следующих простых схем вы с легкостью разберетесь, как нарисовать доброго волка для своего малыша:
Вышеприведенные пошаговые инструкции являются необычайно простыми, и с ними без особого труда разберется самостоятельно ребенок 5-7 лет. Еще один элементарный вариант, как можно с легкостью нарисовать волка – это изобразить его по клеточкам. В этом вам поможет следующая картинка в стиле японского кроссворда:
Как нарисовать волка из «Ну, погоди!»?
Одними из самых любимых персонажей у ребят разных возрастов нередко становятся герои популярного советского мультфильма «Ну, погоди!». Эту забавную сказку любят и дети, и взрослые, и с удовольствием по несколько раз пересматривают одни и те же серии. Следующая пошаговая инструкция подскажет вам, как нарисовать популярного мультяшного волка:
- Нарисуйте окружность и две направляющие кривые. Далее изобразите глаза, как показано на рисунке.
- Следующим шагом нарисуйте большой рот и нос.
- Нос закрасьте черным цветом и не забудьте оставить на нем небольшой белый участок. Далее нарисуйте крупные зубы, язык волка и маленькие дырочки, из которых должны расти усы.
- Изобразите ухо волка, челку и верхнюю часть косы.
- Поскольку вы рисуете волка, изображающего Снегурочку, добавьте соответствующую новогоднюю шапочку. Прорисуйте черные брови и ресницы, а также шею. Вспомогательные линии далее будут не нужны, их можно аккуратно стереть ластиком.
- Дорисуйте длинную косу, одеяние Снегурочки и лапу волка с микрофоном.
- Удалите те участки картинки, которые отмечены красным цветом. Аккуратно сотрите их ластиком, не затрагивая оставшуюся часть изображения.
- Ваш рисунок должен получиться вот таким:
- При желании вы можете раскрасить его цветными карандашами или фломастерами.
Как нарисовать волка, воющего на Луну?
Безусловно, ребенок может захотеть изобразить не только персонажа сказки или мультфильма, но и настоящее животное. Следующий мастер-класс поможет вам нарисовать более реалистичного волка, который воет на Луну темной ночью:
- Поэтапно изобразите лобную часть, пасть, нос, торчащий зуб, ухо и глаз.
- Схематично нарисуйте туловище волка, а также уровень снега на земле.
- Сымитируйте шерсть при помощи штриховых отрезков, а также нарисуйте переднюю лапу и часть задней.
- Удалите ненужные вспомогательные линии и нарисуйте снег.
- Область волка затените светлым тоном.
- Заштрихуйте туловище нашего животного отдельными отрезками разной длины, расположенными близко друг к другу. Там, где нужно сделать рисунок темнее, плотность нанесения штрихов должна быть увеличена.
- Добавьте небольшую растительность, торчащую из-под снега, и слегка заштрихуйте всю картинку так, чтобы получилась имитация ночного времени суток.
Рисунки символами, картинки из символов, символы для вк
.░░░░░░░░░░░░░░░░▄█░▄░░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░░░░░░░░░░▄▀█▄██░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░░░░░░░░▄█▀░████░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░░░░░░▄██▀▄████▄▄▄░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░▄▄████████████▀▀▀███▄░░░░░░░░░
░░░░███████████████▀░░▄▄▄▀█▄░░░░░░░░
░░▄████████████▀▀▀▀░░░░▀▀▀░▀▀▄░░░░░░
░▄██████████▄░░░░░░░░░░░░░░░░░▀▀▄▄░░
▄████████████░░░░░░░░░░░░░░░░░░░░░██
░████████████▄░░░░░░░░░░░░░░░░░░▄▄▀░
░▀████████▀▀░░░░▄▄██████████████▀░░░
░░██████▀░░░░░░█████▀▀░░░░░░░░░░░░░░
░░░████▀░░░░░░█████░░░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░▀█▀░░░░░░▀█████░░░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░░░░░░░░░▀█████░░░░░░░░░░░░░░░░
░░░░░░░░░░░░░░░░▀▀▀███▄░░░░░░░░░░░░░
1¶¶1_________________________________¶¶¶¶¶¶¶¶_____
1¶¶¶¶1______________________________¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶___
1¶¶¶¶¶¶1___________________________¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1_
_¶¶¶¶¶¶¶¶¶________________________1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1
1¶111¶¶¶¶¶¶¶¶1____________________¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶11¶¶
_¶1111¶¶¶¶¶¶¶¶¶1_________________1¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶11¶
_¶¶1111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶¶¶¶___1_______¶¶¶¶¶¶11¶¶¶¶¶¶111
_1111111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶11
__¶111111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶1111¶¶¶¶¶¶11
__1¶111111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶111¶¶¶¶¶¶¶1¶
___1¶1111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11111¶¶¶¶¶¶¶1¶
____1¶11¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶
___111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶¶¶¶¶¶¶¶¶1
___1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶¶1
____¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
___1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
___1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
__¶¶¶¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
__¶¶¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶111¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶
__¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶¶¶¶¶
__1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
___1¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
____¶¶¶111¶¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
____1¶¶¶111¶¶¶¶¶¶111111111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
_____¶¶¶111¶¶¶¶¶¶1111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
______¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶1111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶
______1¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶1111¶111¶1¶
_______¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶1111111111111
_______1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶¶¶¶¶¶¶¶¶1111¶¶¶¶¶111¶111111111
________¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11111111¶¶¶¶¶¶111¶111111111
________1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶111¶1¶¶¶¶¶¶1111¶¶111111111
________1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1¶¶¶¶¶11111111111111111
________¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶111111111111111111111
_______1¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶¶¶11111111111111111111111111
_______1¶¶¶¶¶¶¶111¶¶¶¶¶111111111111111111111111111
______1¶¶¶¶¶¶¶11111¶¶11111111111111111111111111111
_____1¶¶¶¶¶¶¶1111111111111111111111111111111111111
_____¶¶¶¶¶¶¶11111111111111111111111111111111111111
____¶¶¶¶¶¶¶¶1111111111111111111111¶111111111111111
___1¶¶¶¶¶¶¶111111111111111111111¶¶¶1___________1_1
___¶¶¶¶¶¶¶¶1¶11111111111111111¶¶¶1________________
__1¶¶¶¶¶¶1¶¶1111111111111111¶¶¶¶1_________________
_1¶¶¶¶¶¶1111111111111111111¶¶¶1___________________
1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11111111111111¶¶1______________________
¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11111111111¶¶¶________________________
¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1111111111¶¶1_________________________
1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶11¶11111¶¶¶¶___________________________
__1¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶¶1_____________________________
__________________________________________________
…
Как нарисовать карандашом портрет волка поэтапно • Makusha
Голова
Смотрим третью часть обучающей программы по рисованию головы человека карандашом. Все дальнейшие уроки вы
Корабли
Очередной видеоурок рисования. Сегодня я хочу, чтобы вы увидели как рисовать в реалистичном стиле
Как рисовать глаза
На прошлом видеоуроке мы узнали как рисовать женские губы. Теперь же посмотрим еще один
Paint Tool SAI
Давайте снова немного потренируемся рисовать в SAI и на этот раз вместе с замечательной
Драконы
Если бы мы сопровождали свои уроками своеобразными слоганами, то этот имел бы такой: «Всем
Драконы
Я очень люблю драконов и мы их рисовали много раз (дракон раз, два, три,
Как нарисовать разъяренного волка по шагам • Makusha
Поклонники Макуши! Здесь я взываю к вам, чтобы вы бросали мне иногда пожелания для уроков, и благодарю за уже поступившие просьбы. Сегодня нарисуем волка! В ярости, это будет весело и эпично одновременно, мы научимся рисовать волков и давать им настоящий экшн и эмоции. Не торопясь, шаг за шагом, вместе с вами научимся рисовать красивейших из животных. Шаги максимально простые и понятные для того, чтобы добиться успеха в рисовании. Несколько советов по основам анатомии волков именно в этой свирепой позиции. Добудьте себе карандаш, бумагу и ластик, чтобы начать урок вместе со мной. Это может занять несколько попыток, чтобы добиться приемлемого результат, особенно если вы новичок в рисовании, но волки это часть этого искусства. Окунитесь в этом уроке рисования в мир волка и возможно вы научитесь нескольким методам для вашего дальнейшего роста как художника. Спасибо за просмотр и удачи!
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 1.
Во-первых, этот шаг очень важен. Не пропустите этот шаг ни в коем случае, так как это уменьшит ваши шансы в разработке точных моментов будущего рисунка в виде головы рычащего волка. Попробуйте сделать эти базовые шаги как можно точнее.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 2.
Затем просто нарисуем бровь и часть морды в виде носика и верхней части пасти, переносица сложена в напряжении в виде складок. Нос похож на маленькое сердце.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 3.
Затем можем легко справиться с дальнейшей детализацией для морды. Наметьте едва видные тонкой линией складки. С разнообразными по толщине и глубине линиями можно достичь более интересного эффекта. Рисунок получится более эффектным и мощным.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 4.
Теперь я хочу подчеркнуть, что на переносице немного складок, лишь три или четыре на морде. Для более удачной детализации я увеличил рисунок морды волка, чтобы вы рассмотрели точную передачу злости на его лице.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 5.
Теперь будем рисовать верзнюю челюсть вместе с деснами и клыками. Рисуем отдельные зубы вроде холмов с пиками от основных клыков. Десны аналогично.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 6.
Но все же дам совет подробнее. Будьте точны в количестве десен и зубов волка. Десна видны лишь в полнейшей ярости у животного!
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 7.
Теперь рисуем нижнюю челюсть на нашем рисунке разъяренного и рычащего волка. Знаю, что это покажется слишком сложным, но у вас это получится на одном дыхании. Слегка наметьте контуры рта сперва и затем добавьте зубы или язык. Потом займитесь прорисовкой.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 8.
Теперь займемся рисованием формы подбородка и шерсти для формы головы и уха. В отличие от собак у волка более крупная и пухлая голова. Это суровое условие выживания в дикой природе в горах, холодных лесах Канады или Сибири.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 9.
Рисуем глаз со шрамом, убедившись в заметном расстоянии от бровей для переносицы. Добавляем складку для формы челюсти и уха.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 10.
Используем быстрый и простой штрих для остальной части тела, оставляя расстояние между головой и телом. Бросайте себе вызов и рисуйте целиком. Подчеркивайте штрихами шерсть и форму тела волка.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 11.
При дальнейшей детализации, вы должны получить что-то очень похожее на наш рисунок. Ух, как же мне нравится этот рисунок! надеюсь у вас все получилось. Если же не так, то пробуйте снова и пишите мне о своих успехах и неудачах!
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Шаг 12.
Можете постараться добавить цветными маркерами или карандашами жизни рисунку. Надеюсь это поможет вам дорисовать более четко и красиво ваш рисунок.
Как нарисовать разъяренного волка по шагам
Можете также добавить ему фон, например, как на прошлом уроке рисования волка на фоне луны или пройтись со мной по шагам для рисования симпатичной русалки или даже руки зомби! Удачи Вам!
О спецодежде и СИЗ. Защита для глаз и лица
Химическое оружие химическое оружие Война ужасна сама по себе, но ещё страшнее она становится, когда люди забывают об уважении к противнику и начинают использовать такие…Цветные контактные линзы Изумрудные глаза всегда ассоциируются с мистической таинственностью женщины или даже колдовством. Поэтому цветные зеленые линзы различных…
Шевроны частей российской армии Нарукавные знаки формирований ВС России (иногда неправильно именуемые как шевроны) — нарукавные знаки носятся на правом рукаве формы…
Смотреть что такое «Военная форма» в других словарях Военная форма Эту статью предлагается разделить на Военная форма и ряд других. Пояснение причин и обсуждение — на странице… Состав автомобильной аптечки по госту Медицинские приспособления и материалы считаются непременным атрибутом каждого транспортного средства. При этом состав автомобильной… Как подобрать солнечные очки по форме лица Современные женщины и мужчины воспринимают данный аксессуар, как дань моде. Однако его прямое назначение заключается в защите глаз от… Требования, предъявляемые к средствам индивидуальной защиты В соответствии со статьей 221 ТК РФ на работах с вредными и (или) опасными условиями труда, а также на работах, выполняемых в особых… Внимательное отношение к мелочам Погоны специальных войск НКВД встречаются редко, поэтому когда попадается фотография военнослужащего с этими знаками различия, то это… С какой периодичностью проверяют противогазы Палатка для проверки противогазов 1. Для подбора лицевой части и исправности противогазов с помощью хлорпикрина используется…
Рисунки по клеточкам собака
Вы любите собак? А может быть у вас дома есть ваш любимы питомец? и Это конечно же собака. Ведь собаки самые преданные и лучшие друзья для детей а так же взрослых. Мы собрали для вас подборки разных картинок по клеточкам с собаками разных пород. Хватайте карандаши и вперед срисовывать вашего любимого питомца к себе в тетрадь .
Содержание скрыть 1 Для начинающих, маленькие рисунки собак по клеточкам 2 Рисунки по клеточкам Хаски 3 Смотрите видео о том как нарисовать по клеточкам Хаску 4 Нарисовать по клеточкам волка 5 Видео о том как нарисовать волка по клеточкам 6 Чихуа-Хуа рисуем по клеточкам 7 Видео о том как нарисовать Чихуа-Хуа по клеточкам 8 Как нарисовать Таксу по клеточкам 9 Видео о том как нарисовать Таксу по клеточкамДля начинающих, маленькие рисунки собак по клеточкам
Рисунки по клеточкам Хаски
Смотрите видео о том как нарисовать по клеточкам Хаску
Нарисовать по клеточкам волка
Волк
Волк воющий на луну
Видео о том как нарисовать волка по клеточкам
Чихуа-Хуа рисуем по клеточкам
Вы помните этих маленьких трясущихся собачек? А может это ваш любимый питомец и вы хотите его нарисовать и себя в блокноте по клеточкам.
Видео о том как нарисовать Чихуа-Хуа по клеточкам
Как нарисовать Таксу по клеточкам
А может быть вы любите Такс ? Этих забавных собачек с длинным туловищем и короткими Лапками:
Видео о том как нарисовать Таксу по клеточкам
Post Views: 22 691
Познакомьтесь с ученым-художником, который превращает смертоносные вирусы в прекрасные произведения искусства | Наука
Дэвид Гудселл упаковывает свои акварели, изображающие вирусы ВИЧ, Эбола и Зика, с реалистичными деталями.
Дэвид Гудселл (CC-BY-4.0)Джон Коэн
ВИЧ, Эбола и Зика — уродливые и отвратительные вирусы. Дэвид Гудселл заставляет их выглядеть красиво, даже соблазнительно. И необычная точность его изображений обусловлена наукой — в некоторых случаях его собственными исследованиями.
Гудселл — структурный биолог в Scripps Research в Сан-Диего, Калифорния, и он рисует акварелью вирусов и клеток с точными научными характеристиками. Многие ученые занимаются рисованием на стороне, но картины Гудселла тесно связаны с его собственными исследованиями молекул, которые образуют клетки и патогены.Его изображения появились на обложках многих журналов, в том числе Science и Cell . Он также выпустил четыре книги, в которых представлены его картины ( Машины жизни , Наша молекулярная природа: двигатели, машины и сообщения тела , Бионанотехнология: уроки природы и Атомные доказательства: видение молекулярной основы жизни ), образовательные плакаты («Экскурсия по клетке человека», «Борьба с гриппом: иммунитет и инфекция») и программа, к которой общественность может получить доступ для создания своих собственных иллюстраций о ВИЧ (CellPAINT).Конференция по ретровирусам и оппортунистическим инфекциям в этом году представила его изображение ВИЧ в качестве логотипа.
В дополнение к изучению изображений клеток с помощью мощных микроскопов, Гудселл полагается на молекулярные структуры из электронной микроскопии (ЭМ), рентгеновской кристаллографии и спектроскопии ядерного магнитного резонанса, чтобы создавать свои картины, которые показывают часто переполненный и сложный мир клетки и микробы, которые их заражают. Он даже использует известные веса молекул, если это все, что у него есть, чтобы он мог по крайней мере нарисовать, скажем, круг правильного размера.«Я в первую очередь ученый, — говорит он. «Я не делаю редакционные изображения, предназначенные для продажи журналов. Я хочу каким-то образом проинформировать ученых и кабинетных ученых о состоянии знаний в настоящее время и, надеюсь, дать им интуитивное представление о том, как эти вещи на самом деле выглядят или могут выглядеть », — говорит он.
Может посмотреть?
«Эти картины имеют тонны, тонны и тонны художественной лицензии», — говорит он. «Это всего лишь один снимок чего-то, что по своей сути сверхдинамично.Каждый раз, когда я пишу картину, на следующий день она устаревает, потому что выходит гораздо больше данных ».
Первоначально получив образование рентгеновского кристаллографа, Гудселл в начале 1980-х начал играть с сеткой молекулярной биологии с программами компьютерной графики, которые в то время в основном использовались публикой для игр-симуляторов полета. «Никто не знал, как пользоваться программами, и я стал местным экспертом», — говорит Гудселл. «У меня сразу же появилась художественная отдушина.”
В 1987 году Гудселл приехал в Скриппс, чтобы работать с вычислительным структурным биологом Артуром Олсоном. «Он был одним из первых в мире, кто занимался молекулярной графикой», — говорит Гудселл, который также работает по совместительству в Университете Рутгерса.
Офис Гудселла находится дальше по коридору от офиса Олсона и выглядит как магазин игрушек, с полкой за полкой, заполненной трехмерными моделями, которые он сделал из молекул. «Работа Дэвида — это удивительное сочетание науки и искусства», — говорит Олсон, который сам является ученым-художником.«Науки в его картинах так же много, как и в его художественных способностях. Картина — это небольшая часть работы, которая входит в любую из его иллюстраций. По большей части это литературная работа, пытающаяся получить как можно более точную и полную модель, доступную в настоящее время для того, что он изображает ».
Я хочу каким-то образом проинформировать ученых и кабинетных ученых о том, как обстоят дела в настоящее время, и, надеюсь, дать им интуитивное представление о том, как эти вещи на самом деле выглядят или могут выглядеть.
Дэвид Гудселл, Scripps Research
Гудселл хотел иметь больше «биологической связи» с некоторыми из загадочных проблем, которые он изучал — статья 1987 года, которую он опубликовал вместе с Олсоном, озаглавлена «Визуализация объемных данных в молекулярных системах», — поэтому он взял в руки ручку в начале. 90-е и начал рисовать тушью. «Я хотел вернуться к биологии, поэтому я поставил перед собой задачу: могу ли я нарисовать взорванную клетку со всем в нужном месте?» он говорит.«Я остановился на [бактерии] E. [Escherichia] coli , потому что в то время было больше данных, подтверждающих это. На самом деле данных едва хватило для убедительной работы. Я потратил много времени на использование индекса цитирования в библиотеке, отслеживая молекулы по одной в поисках концентраций ».
Эти рисунки вернули его к акварельной живописи, которой он научился у своего деда. «Цвета полностью созданы», — говорит он, отмечая, что большинство белков не имеют цвета.«Я просто использую цвета, которые мне нравятся, и цвета, которые, как мне кажется, позволят вам различать различные функциональные отделения».
Джанет Иваса, опытный клеточный биолог, заведующая лабораторией анимации в Университете штата Юта в Солт-Лейк-Сити, говорит, что работа Гудселла оказала далеко идущее влияние на других художников, изображающих науку. «Большинство молекулярных аниматоров, таких как я, считают его отцом нашей области в том, что касается точного научного подхода к молекулярной визуализации», — говорит Иваса.«Он шел впереди».
Жизненный цикл ВИЧ — рассказано Джанет на Vimeo.
Иваса говорит, что использование акварелью Гудселлом заметно отличается от более обычных компьютерных научных иллюстраций (что он тоже делает). «Есть что-то немного холодное в визуальных эффектах, созданных с помощью компьютеров, — говорит она. «Мне нравится, как его картины выглядят так, будто они созданы человеком. Они напоминают тот факт, что наукой занимаются люди, ученые, и это не то, что является полным фактом, а то, что мы предполагаем, гипотеза в человеческом разуме.Гипотеза о том, что внутри человеческой клетки — творение человека ».
Иваса и Гудселл подробно описали жизненный цикл ВИЧ в рамках отдельных, но связанных консорциумов (Центр структурной биологии элементов клеточного хозяина в процессе выхода, торговли и сборки ВИЧ и Взаимодействие с ВИЧ в Центре эволюции вирусов). ), что они принадлежат к фокусу, посвященному выяснению того, как белки вируса СПИДа взаимодействуют с человеческими клетками. Сравните и сопоставьте анимированное видение процесса Ивасы (см. Выше) с серией картин Гудселла:
Олсон отмечает, что традиционные медицинские иллюстраторы используют «различные приемы иллюстрации», чтобы прояснить ситуацию.«Когда вы видите рисунок органа, вы не видите повсюду скопление крови», — говорит Олсон. По его словам, использование Гудселлом акварели служит той же цели. «Его цвета действительно очень информативны», — говорит он.
Хелен Берман, структурный биолог из Университета Рутгерса в Пискатауэй, штат Нью-Джерси, говорит, что ключевым аспектом работы Гудселла является то, что он делает науку доступной для более широкой аудитории. Берман ранее управлял Protein Data Bank, онлайн-базой данных, содержащей структурную информацию и трехмерные формы белков, и долгое время в нем было изображение «Молекула месяца», которое генерирует компьютер Гудселла (но он использует некоторые уловки медицинского иллюстратора, чтобы заставить их выглядеть нарисованный от руки).
«У него есть талант показывать правильную часть вещей и в правильном контексте», — говорит Берман, у которой одна из его картин хранится в гостиной. «Я очень ценю его работу».
По мере того, как технологии продолжают совершенствоваться, Гудселл говорит, что разрешение мезоуровня, которое он изображает — от 10 до 100 нанометров — становится все резче и резче. В частности, крио-ЭМ, лауреат Нобелевской премии по исследованию замороженных образцов молекул, произвела революцию в том, как он выполняет свою работу.«Я работаю здесь между атомами, молекулами и клетками, и пока нет действительно хорошего экспериментального способа увидеть этот уровень», — говорит Гудселл. «Мне очень нравится, что я делаю видимым это царство, которое на самом деле недоступно. Но когда крио-ЭМ дойдет до того уровня, когда он сможет это увидеть, я надеюсь, что это будет похоже на то, что я себе представлял. И это выводит меня из бизнеса. Довольно скоро нам не придется ничего придумывать.
эмбрионов, клонирование, стволовые клетки и перспективы перепрограммирования — искусство и политика науки
За последнее десятилетие исследования стволовых клеток стали наиболее заметным и спорным проявлением перспектив биологической науки, сродни геному человека Проект 1990-х годов или исследования рекомбинантной ДНК и биотехнологии в 1970-х и 1980-х годах.Термин «стволовые клетки» — сокращенно от спорного типа, эмбриональных стволовых клеток человека — в настоящее время широко признан и представляет собой определяющую проблему для кандидатов в национальной и местной политике.
Для биолога «стволовые клетки» имеют точное значение, охватывая не только человеческий эмбриональный тип, который привлекает политическое внимание. Все многочисленные специализированные клетки животных и человека развились в результате упорядоченного процесса деления и дифференциации клеток. В начале этих путей развития находятся незрелые клетки, способные при делении продуцировать дочерние клетки двух типов: одна дочерняя клетка неотличима от своей родительской (и имеет те же возможности), а другая сделала шаг к специализации.Эти незрелые клетки, которые обновляются и производят дифференцированное потомство, называются стволовыми клетками. Многие стволовые клетки находятся во взрослой ткани и обладают ограниченной способностью к дифференцировке, становясь клетками только в определенном органе, таком как кожа, печень, мозг или кровеносная система. Но стволовые клетки с гораздо большим потенциалом появляются в изобилии гораздо раньше в развитии животных, на первых стадиях развития эмбриона. Эти ранние эмбриональные стволовые клетки могут служить предшественниками всех клеток, образующих ткани и органы зрелого животного; из-за этого «множественного» потенциала их называют плюрипотентными.
Эмбриональные стволовые клетки приобрели известность отчасти из-за все еще необоснованных надежд на то, что методы лечения, использующие их, могут облегчить множество человеческих недугов. Они вызвали споры главным образом потому, что клетки получены из человеческих эмбрионов, что связывает исследования стволовых клеток с историческими битвами по поводу абортов и правового и морального статуса человеческого эмбриона и плода.
Текущие дебаты о стволовых клетках и политике, регулирующей их использование, были вызваны тремя ключевыми событиями, которые произошли во время моего пребывания на посту директора NIH в 1990-х: пророческий отчет группы NIH в 1994 году о перспективах исследований первых людей. эмбрион; рождение ягненка по имени Долли, первого животного, клонированного из взрослой клетки, в 1997 году; и выделение и рост плюрипотентных стволовых клеток из очень ранних человеческих эмбрионов в 1998 году.Чтобы понять природу и историю дебатов, полезно рассмотреть, как эти три темы — исследования эмбрионов, репродуктивное клонирование и эмбриональные стволовые клетки — взаимосвязаны как биологически, так и политически. Также будет важно описать более новые методы, менее противоречивые, чем методы, предполагающие использование эмбрионов, которые также могут производить плюрипотентные клетки. Вместе эти разработки изменили наши представления о биологических системах и вывели политические дискуссии о науке на новый уровень сложности.
Каждое из трех событий 1990-х годов имело определяющую характеристику. В отчете 1994 года об исследованиях человеческих эмбрионов, вдохновленном научными возможностями, возникшими в основном из недавних работ с мышиными эмбрионами, рекомендовалось, чтобы многие (но не все) из этих возможностей были использованы Национальным институтом здравоохранения на человеческих клетках и эмбрионах. В отчете также предвосхищались важные достижения в биологии млекопитающих, которые могут позволить использовать исследования, связанные с эмбрионами, в клинических условиях. Несмотря на то, что он был написан в ответ на новую и потенциально благоприятную политическую среду, изменения в политическом климате вскоре привели к запретам, которые продолжают ограничивать большую часть исследований, рекомендованных в отчете.Рождение Долли в 1997 году стало замечательным научным достижением, которое коренным образом изменило взгляд биологов на контроль генетической информации в клетках животных. Он показал большую, чем ожидалось, способность «перепрограммировать» клетки — перезагрузить генетическую программу, которая направляет развитие. Но рождение Долли также вызвало опасения по поводу репродуктивного клонирования человека, которые ограничили поиск многообещающего метода репрограммирования клеток в терапевтических целях. Наконец, появление исследований эмбриональных стволовых клеток человека, последовавшее за ростом первых линий таких клеток в 1998 году, переместило этические дебаты об использовании человеческих эмбрионов от спекуляций к прагматической непосредственности, с четкими последствиями для темпов, с которыми такие клетки исследования будут продолжаться в этой стране.
Размышляя об исследованиях с человеческими эмбрионами
Любой отчет о последних разработках в области исследования эмбрионов, клонирования и стволовых клеток должен начинаться как минимум за несколько десятилетий до того, как были объявлены клоны животных и человеческие эмбриональные стволовые клетки, с кратким описанием двух основных достижений: успешное развитие в Соединенном Королевстве процедур экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в конце 1970-х и расцвет генной инженерии с экспериментальными мышами в 1980-х.
Рождение Луизы Браун, первого ребенка, зачатого в результате ЭКО, в Англии в 1978 году коренным образом изменило взгляды общества на ранние стадии человеческого развития. 1 Идея манипулирования жизнью, позволяя оплодотворению яйцеклетки сперматозоидом происходить в пробирке, а затем имплантировать крошечный эмбрион в восприимчивую матку через несколько дней, встретила ожидаемое сопротивление. Но первоначальное сопротивление к настоящему времени преодолено успехом процедур ЭКО для лечения репродуктивных нарушений, что позволяет многим тысячам бесплодных пар получать удовольствие от вынашивания и воспитания детей.
В годы, последовавшие сразу после первых успехов ЭКО, U.Правительство С. установило требование, согласно которому любое предлагаемое исследование оплодотворения человека, эмбрионов или более поздней стадии развития плода должно быть рассмотрено консультативным советом по этике, прежде чем федеральные средства могут быть использованы для его поддержки. С 1980 по 1993 год при администрациях Рональда Рейгана и Джорджа Буша-младшего никогда не собиралось правление, и на такие исследования никогда не тратились федеральные доллары. Следовательно, работа по ЭКО в этой стране в основном ограничивалась клиническим использованием, часто в частном секторе; Улучшения в методах ЭКО во многом стали результатом исследований, проведенных за рубежом.Кроме того, не было проведено поддерживаемых государством исследований по изучению использования клеток или тканей абортированных плодов или неиспользованных ранних эмбрионов для лечения заболеваний человека, таких как болезнь Паркинсона, которые были вызваны потерей нормальных клеток.
В 1993 году прибытие Билла Клинтона в Вашингтон возобновило возможность поддержки исследований развивающихся форм человека — эмбрионов и плодов. Одним из первых действий нового президента было подписание нового законопроекта NIH о повторной авторизации, который снял ранее существовавшие ограничения на использование федеральных средств для исследований с тканями человеческого плода и эмбрионами. 2 Вскоре после этого NIH начал финансировать исследования тканей плода — например, клинические испытания методов лечения болезни Паркинсона клетками мозга плода — в соответствии с уже существующими руководящими принципами этичного приобретения и использования тканей плода. *
Но ни одна администрация не рассматривала перспективы исследований человеческих материалов с гораздо более ранней стадии развития — доимплантационного эмбриона. Эта стадия обычно начинается с оплодотворения яйцеклетки одной сперматозоидной клеткой, образуя одноклеточный эмбрион, также называемый зиготой, который делится несколько раз в течение следующих десяти-четырнадцати дней, после чего эмбрион обычно имплантируется в стенку матка.В этот момент эмбрион начинает формировать три основных тканевых слоя, которые являются предшественниками многих типов клеток, присутствующих в зрелых органах, даже несмотря на то, что никакая распознаваемая нервная система или другие органы еще не различимы.
Преимплантационные человеческие эмбрионы в течение многих лет обычно производились с помощью ЭКО, объединения донорской яйцеклетки и спермы в пробирке с целью получения потомства для бесплодных пар. Через несколько дней после ЭКО эмбрионы, которые кажутся жизнеспособными, помещаются в родовые пути женщины в надежде, что один или несколько из них будут имплантированы в стенку матки и превратятся в нормального ребенка.Однако не все эмбрионы, полученные в результате экстракорпорального оплодотворения, на самом деле используются в попытках произвести новое потомство либо потому, что эмбрионы не кажутся нормальными, либо, что чаще, потому, что клиника ЭКО произвела больше эмбрионов, чем было необходимо для достижения репродуктивных целей пары. .
Поскольку исследования процесса ЭКО или полученных в результате ранних эмбрионов никогда не проводились за счет федеральных средств в Соединенных Штатах, ни до, ни после рождения Луизы Браун, не было никаких руководящих принципов или правил для таких исследований.Это означало, что федеральное финансирование исследований человеческого эмбриона в любом из его аспектов — экстракорпорального оплодотворения, образования зиготы (оплодотворенной яйцеклетки), ранних клеточных делений и первых шагов в дифференцировке этих крошечных скоплений человеческих клеток — должно было иметь следует отложить до тех пор, пока не будут более тщательно проанализированы различные типы исследований эмбрионов и не будут предложены руководящие принципы.
Были веские причины изучить перспективы. За предыдущие два или три десятилетия биологи добились огромного прогресса в изучении раннего развития эмбрионов мышей, наиболее широко изученных млекопитающих.Относительно легко получить оплодотворенные яйцеклетки у лабораторных мышей и затем наблюдать за последующими делениями клеток, пока эмбрионы не будут содержать от пятидесяти до ста клеток или более и будут готовы к имплантации в репродуктивный тракт самок. На этом этапе дезагрегированные клетки эмбрионов мыши могут бесконечно расти и делиться в чашках Петри при правильном кормлении. Эти клетки также могут развиваться во все виды органов или тканей. Например, если они вводятся интактному эмбриону, который затем созревает до новорожденной мыши, потомки стволовых клеток могут вносить вклад в любую часть зрелого животного.Таким образом, они соответствуют определению плюрипотентных стволовых клеток: они делятся, давая дочерние клетки, которые неотличимы от исходных клеток («самообновление»), и они дифференцируются на большое разнообразие типов («плюрипотентность»).
За последние пару десятилетий работа с ранними эмбрионами мыши — и со стволовыми клетками, полученными из них — была значительно усилена некоторыми мощными новыми методами, которые позволяют генетическую модификацию зародышевой линии мыши и тщательное изучение функций генов млекопитающих.Картирование ДНК и секвенирование — особенности проекта «Геном мыши» — определили генетический состав и организацию хромосом мышей и идентифицировали гены, которые участвуют в формировании и функционировании определенных тканей. Гены, которые управляют нормальным развитием и вызывают заболевания, в настоящее время регулярно изучаются на мышах путем изменения генетической структуры раннего эмбриона. Это можно сделать двумя способами. Во-первых, гены могут быть добавлены к зародышевой линии мыши, помещая их непосредственно в оплодотворенные яйца, а затем гены будут переданы потомству мыши. 3 Перед этим маневром гены можно мутировать, чтобы имитировать генетические изменения, наблюдаемые при заболеваниях человека, или сконструировать так, чтобы они были выражены по желанию исследователя. Во втором подходе любой ген в культивируемой эмбриональной стволовой клетке может быть специально нацелен для создания мутаций, которые исследуют нормальные функции гена или повторяют мутации, обнаруживаемые при заболеваниях человека. 4 Опять же, при соответствующих манипуляциях эти мутации могут проникать в зародышевую линию зрелых мышей. Эти два метода были чрезвычайно важны для изучения нормальных функций и многих заболеваний у млекопитающих, но в настоящее время они, соответственно, запрещены для людей. *
К 1993 году работа с мышиными эмбрионами породила множество провокационных и проверяемых идей о том, как ранние клетки дифференцируются с образованием зрелых тканей и как возникают заболевания. Эти идеи имеют отношение к аналогичным человеческим событиям, отчасти из-за большого сходства, наблюдаемого между мышами и людьми, когда сравниваются их геномы, биохимические свойства и функции клеток. К началу 1990-х годов также было широко признано, что многие человеческие эмбрионы хранились в морозильных камерах и предназначались для уничтожения в клиниках ЭКО в США и других странах, поскольку они слишком долго хранились в замороженном состоянии для эффективной имплантации в матку или матку. потому что доноры спермы и яйцеклеток либо уже достигли родительских прав, либо отказались от попыток воспроизвести потомство по другим причинам.Таким образом, многие виды работы с человеческими эмбрионами были бы возможны без создания дополнительных эмбрионов для исследовательских целей.
Но какую работу следует продолжать? В конце 1993 года, после того как были ослаблены законодательные ограничения на федеральное финансирование исследований человеческих эмбрионов и тканей плода, мы с коллегами из NIH собрали группу, чтобы подумать над этим вопросом. Группу по исследованию человеческих эмбрионов попросили изучить экспериментальные возможности в области исследования человеческих эмбрионов и рекомендовать те из них, которые заслуживают проведения за счет федеральных средств, исходя из научных достоинств, возможных медицинских применений и этических последствий. **
Нам посчастливилось привлечь к работе в группе широкий круг видных людей из нескольких областей медицины, юриспруденции и этики, в том числе в качестве председателя доктора Стивена Мюллера, бывшего президента Университет Джона Хопкинса. В течение следующего года группа встречалась неоднократно, как на открытых, так и на закрытых сессиях; заказал отчеты по нескольким этическим, медицинским и научным аспектам исследования эмбрионов; и обсуждали каждое решение энергично и разумно. * В соответствии с запросом, комиссия предложила продуманные суждения о видах исследований, которые должны поддерживаться федеральными фондами, которые не должны поддерживаться и которые следует отложить для рассмотрения до тех пор, пока не будет доступна дополнительная информация или не будет проведено дальнейшее обсуждение.
Оглядываясь назад на сегодняшний длинный доклад комиссии, 5 с нашими гораздо более глубокими знаниями об эмбрионах, клонировании и стволовых клетках, я нахожу его предвидение поистине удивительным. Группа предвидела через несколько лет несколько важных разработок, включая получение стволовых клеток из человеческих эмбрионов и использование методов клонирования в исследованиях эмбрионов. И он сделал пророческие наблюдения о том, как эти разработки могут быть использованы в медицинских целях. В частности, в 1994 году группа предвидела перспективу выращивания человеческих эмбриональных клеток из ранних эмбрионов, хотя в лаборатории еще не было выращено стволовых клеток из каких-либо эмбрионов приматов.Из более ранней работы с мышами члены комиссии знали, что эмбриональные стволовые клетки могут иметь потенциал для развития во многие определенные типы тканей; в таком случае их можно использовать для восстановления поврежденных тканей или для лечения хронических дегенеративных заболеваний головного или спинного мозга, эндокринных органов (таких как островки поджелудочной железы), мышц, суставов или других тканей.
Но комиссия также признала биологические трудности, которые могут возникнуть при таком лечении. Например, клетки уже существующих эмбрионов, вероятно, будут генетически отличаться от клеток пациентов, получавших терапию эмбриональными стволовыми клетками.Если это так, иммунная система пациента отвергнет трансплантированные клетки как чужеродные. По этой причине группа утверждала, что иногда может быть приемлемым создание эмбрионов, которые более адекватно представляют весь спектр генетического разнообразия человека. Это будет сделано с помощью ЭКО со спермой и яйцеклеткой, пожертвованными взрослыми людьми различного этнического происхождения. Стволовые клетки, полученные из этих эмбрионов, увеличивают вероятность хорошего совпадения между клетками, используемыми в терапии, и реципиентами (пациентами). Но создание иммунологического разнообразия таким образом также пересекло бы этическую черту, которую несколько членов комиссии не хотели пересекать: создание человеческих эмбрионов для целей, отличных от воспроизводства — в данном случае, медицинских исследований и лечения.
При рассмотрении других способов преодоления проблемы иммунного отторжения при воображаемом использовании человеческих стволовых клеток в медицине группа также обсудила особенно пророческую стратегию, которая зависела от возможности «перепрограммирования» генов у зрелых (взрослых) клетки, так что полученные клетки будут вести себя как эмбриональные стволовые клетки. Эта стратегия была основана на единственном известном тогда методе «перепрограммирования» клеток на более раннюю фазу развития: перенос ядра соматической клетки. Этот метод, который позже использовался в процессе производства Долли, включает перенос ядра клетки с полным репертуаром ДНК человека от соматической клетки, такой как клетка кожи взрослого человека, в неоплодотворенное яйцо, из которого ядро был удален.
Перенос ядра не был полностью новой идеей даже в 1994 году. Более трех десятилетий назад британские биологи-эволюционисты во главе с Джоном Гардоном из Оксфордского университета наэлектризовали научное сообщество, перенеся ядра из зрелых клеток кожи лягушки в лягушку. яйцо лишено ядра. 6 Реинжиниринговые клетки неоднократно делились и в конечном итоге дали начало головастикам, подразумевая, что гены перенесенных ядер клеток кожи были «перепрограммированы», чтобы управлять многими этапами в раннем развитии лягушек.Каждый головастик был клоном, генетически идентичным близнецом лягушки, от которой были получены клетки кожи. Но взрослые животные — полноценные лягушки с репродуктивной способностью — никогда не появлялись после стадии головастика; предположительно перепрограммирование было неполным. Аналогичные эксперименты с млекопитающими были настолько неудачными, что многие биологи пришли к выводу, что перепрограммирование генов, необходимое для истинного клонирования животных путем переноса ядер, может оказаться невозможным.
Тем не менее, группа экспертов признала, за несколько лет до появления Долли, что если бы ядерная передача могла работать у млекопитающих — даже просто для начала разработки, а не обязательно для получения зрелого животного, — воздействие было бы большим.Например, если ядро клетки пациента может быть перенесено в яйцеклетку для создания раннего эмбриона, из которого могут быть получены терапевтически полезные стволовые клетки, стволовые клетки будут иметь генетический состав, идентичный таковому у человека, подлежащего лечению. Тогда иммунное отторжение вряд ли произойдет. В отсутствие каких-либо доказательств того, что репродуктивное клонирование млекопитающих с получением полноценного потомства возможно, группа думала о переносе ядра просто как о средстве создания клонированных эмбрионов и полезных линий стволовых клеток для исследования и терапии — стратегия, которая теперь называется терапевтической. клонирование.
Группа проницательно отметила, что перенос ядра, в отличие от ЭКО, является бесполым процессом, генерирующим эмбрионы (и эмбриональные стволовые клетки), генетически неотличимые от клеток ядерного донора, предполагаемого пациента, а не эмбрионов (и клеток) с совершенно новыми комбинациями гены. Это было разумно рассмотрено как более приемлемое с этической точки зрения, чем создание новых эмбрионов путем оплодотворения. Другими словами, при переносе ядра будет использоваться уже существующая комбинация генов, комбинация, присутствующая у донора, чтобы создать ранний эмбрион, через который будут происходить плюрипотентные стволовые клетки.Напротив, производство генетически разнообразных эмбрионов и линий стволовых клеток будет смешивать гены из множества различных пар сперматозоидов и яйцеклеток, давая эмбрионы с уникальными комбинациями генов — новыми биологическими объектами, которые требуют большей этической озабоченности.
Эти предположения привели к наиболее спорным и политически сложным рекомендациям комиссии. Ссылаясь на потенциальные клинические преимущества, комиссия одобрила (с парой несогласных и только при определенных условиях, этических принципах и тщательном надзоре) использование федеральных средств в особых ситуациях для двух спорных методов создания плюрипотентных стволовых клеток, которые могут оказаться полезными. в терапии: ЭКО для создания генетически разнообразных эмбрионов, из которых могут быть получены стволовые клетки, и перепрограммирование путем переноса ядра соматических клеток, чтобы сделать плюрипотентные клетки иммунологически совместимыми с предполагаемыми пациентами.Группа одобрила эти рекомендации, хотя ни рост эмбриональных стволовых клеток человека, ни перенос ядер с клетками млекопитающих еще не были выполнены.
Политические последствия отчета комиссии по исследованию эмбрионов человека
Несмотря на то, что он был хорошо принят учеными, наблюдавшими за ее работой, доклад группы вызвал бурю правительственной оппозиции даже в либеральной администрации Клинтона. Я несколько раз посещал старое административное здание, чтобы проинформировать сотрудников Белого дома задолго до запланированной презентации официального отчета группы в начале декабря 1994 года.На этих сессиях я объяснил методы и цели исследования эмбрионов, показал фотографии, которые отображали аморфный, недифференцированный характер крошечных ранних человеческих эмбрионов, и обрисовал предстоящие рекомендации группы, некоторые из которых неожиданно появились в прессе еще в августе. .
Несмотря на мои усилия, старшие советники президента по-прежнему беспокоились. Мы планировали опубликовать отчет официально после заседания моего консультативного совета 2 декабря, но Белый дом был шокирован потерей Демократической партией контроля над обеими палатами Конгресса на промежуточных выборах, состоявшихся месяцем ранее.Демократы по всей стране, особенно в высших эшелонах администрации Клинтона, были обеспокоены сдвигом электората в сторону консервативной политики Ньюта Гингрича и его республиканских революционеров и уже обеспокоены президентскими выборами 1996 года.
Я помню мне позвонил Леон Панетта, тогдашний глава администрации Белого дома, и сказал, что я должен отклонить некоторые рекомендации комиссии, в частности те, которые могут разрешить использование федеральных средств для создания эмбрионов в исследовательских целях.Я отказался сразу отклонить рекомендации моей группы. Меня не уволили, поскольку тон звонка Панетты звучал угрожающе. Но 2 декабря, через несколько часов после того, как отчет комиссии был одобрен моим консультативным советом и официально опубликован, Белый дом издал исполнительный приказ, подписанный президентом, запрещающий Национальным институтам здравоохранения поддерживать любые исследования, которые влекут за собой создание эмбрионов для исследований. . *
Многие люди думали (и до сих пор думают), что исполнительный приказ был более запретительным, чем он был, возможно, потому, что он пришел так внезапно и со стороны такой высокой власти, и потому что за ним последовали более строгие ограничения, наложенные недавно Республиканский съезд.Фактически, исследования, которые президент признал неприемлемыми для федерального финансирования, составляли очень небольшую часть рекомендаций комиссии, и постановление не противоречило подавляющему большинству рекомендаций в поддержку исследований эмбрионов. Совершенно очевидно, что это не ограничивало множество экспериментов с использованием донорских эмбрионов, изначально созданных для репродуктивных целей, но предназначенных для утилизации. Например, можно было бы продолжить почти все то, что сейчас называется исследованием стволовых клеток, включая получение, изучение и использование новых линий стволовых клеток из человеческих эмбрионов, пожертвованных бесплодными парами, проходящими лечение в клиниках ЭКО.
Сейчас, почти четырнадцать лет спустя, федеральное финансирование исследований человеческих эмбрионов остается остановленным из-за запрета Конгресса, действовавшего двенадцать лет назад, а шестилетняя политика президента Джорджа Буша ограничивает финансирование исследований эмбриональных стволовых клеток человека. о ячейках, созданных до 9 августа 2001 года. Таким образом, с текущей точки зрения, распоряжение Клинтона от 1994 года кажется относительно мягким и даже снисходительным. Тем не менее директива оказала сильное влияние. Наши последующие обсуждения в NIH были окрашены страхом, что любое быстрое движение к финансированию любого из разрешенных исследований эмбрионов будет атаковано недавно влиятельным правым крылом республиканцев и может негативно повлиять на бюджет агентства, который, как всегда, был главной проблемой для NIH и его избиратели.Администрация, конечно же, не призывала нас проводить исследования эмбрионов. И тем из нас, кто отвечает за политику NIH, были настоятельно рекомендованы знающие люди, как внутри, так и за пределами правительства, действовать осторожно на этой спорной арене. Так что мы были осторожны. Не были составлены руководящие принципы, не запрашивались заявки на финансирование и не выдавались гранты на исследования человеческого эмбриона любого рода.
В такой атмосфере консервативные члены Конгресса, стремившиеся к более широким ограничениям, могли быть воодушевлены указом президента.Действительно, несколько месяцев спустя, в начале 1995 года, во время переговоров по бюджету NIH на 1996 год, два республиканских члена Подкомитета по ассигнованиям Палаты представителей по вопросам здравоохранения, труда и образования, Джей Дики из Арканзаса и Роджер Уикер из Миссисипи, написали поправку к законопроект о расходах этого года для предотвращения любого использования средств, находящихся под юрисдикцией комитета, для экспериментов, которые могут создать, повредить или уничтожить человеческий эмбрион. Этот запрет включал в себя множество типов исследований, приемлемых для администрации Клинтона, в том числе работу с донорскими эмбрионами, и был написан с целью сделать определение эмбриона как можно более широким.Так называемая поправка Дики-Уикера прилагалась в качестве «всадника» к каждому последующему законопроекту о ассигнованиях NIH. Он по-прежнему запрещает федеральное финансирование практически любых работ с человеческими эмбрионами.
Рождение Долли и призрак репродуктивного клонирования человека
В один из выходных зимой 1997 года, когда я готовился к ежегодным слушаниям по бюджету Национального института здравоохранения перед Подкомитетом по домашним ассигнованиям, я был ошеломлен историей на фронте страница Sunday New York Times Джины Колата.В ее статье описывается отчет, который вскоре появится в журнале Nature , в котором Ян Уилмут и его коллеги из Института Рослина в Шотландии объявили о рождении Долли, первом хорошо задокументированном случае клонирования животного (ягненка из Финн-Дорсета). из взрослой клетки. 8
Еще до того, как я получил настоящий отчет в Nature , я мог видеть, что эта новость была взрывоопасной. Для тех, кто знаком с биологическими исследованиями, подвиг создания клонированного животного путем переноса ядра из взрослой клетки в яйцеклетку полностью изменил бы устоявшееся предположение о том, что невозможно «перепрограммировать» клетку так полностью.Группа по исследованию эмбрионов человека отметила частичный успех Джона Гардона в перепрограммировании ядер из клеток кожи лягушки и рекомендовала использовать перенос ядер для создания клонированных стволовых клеток человека. Но Уилмут пошел намного дальше Гэрдона. Его команда полностью перезапустила программу одной узкоспециализированной зрелой клетки — клетки, полученной из ткани груди взрослой овцы, — так что ядро могло управлять формированием законченного, сложного организма с его многочисленными разновидностями зрелых типов клеток. . Однако для широкой публики рождение Долли поднимет тревожный вопрос: перспектива клонирования человека — поколения новых людей с генетической конституцией, по существу идентичной конституции человека, предоставившего клетки для процесса клонирования.Эта возможность породит широкий круг вопросов о целях, применении и этике современных биологических исследований.
Все эти выпуски были быстро и публично освещены в течение нескольких недель после публикации статьи Уилмута — в бесчисленных новостях, колонках и письмах в прессу; в Белом доме, где президент попросил недавно созданную Национальную консультативную комиссию по биоэтике (NBAC) рассмотреть последствия новых экспериментов; и на слушаниях в Конгрессе, как тех, к которым я готовился в ходе цикла ассигнований NIH, так и других.
Мы не слишком далеко зашли в привычный круговорот относительно предложения президента по бюджету NIH на 1998 год, прежде чем Джон Портер, председатель Подкомитета по ассигнованиям, поднял самые последние новости из Шотландии. Указывая на то, что эта история «шокировала многих в научном сообществе, потому что они сказали, что это невозможно», Портер затем спросил: «Является ли это достоверной наукой, приведет ли она к клонированию взрослых людей, каковы последствия, и то и другое. положительные и отрицательные для самой науки и каковы этические последствия.. . для всего общества ». Это было очень хорошее резюме того, что интересовало хорошо информированных людей. Я спросил: «Сколько у меня времени, мистер Портер?» Он сказал: «Сколько угодно».
Учитывая эту беспрецедентную свободу, я говорил беспрецедентно долго, в ответ, который занял почти шесть страниц опубликованной стенограммы слушания. 9 (После того, как я закончил, Портер сказал: «Доктор Вармус, это, вероятно, самый длинный ответ, который когда-либо не прерывал член Конгресса»). Я рассказал подкомитету о классических экспериментах Гардона по переносу ядер с помощью клеток лягушки; о более ранней работе Вильмута, показывающей, что ядра очень ранних эмбрионов ягненка (еще не из клеток овец) могут быть перенесены в энуклеированные овечьи яйца, давая эмбрионы, которые при имплантации в матку созревают в полноценные ягнята; и, наконец, о последнем успехе Вильмута, проводящем тот же эксперимент с ядрами старых эмбрионов, плодов и, что наиболее важно, клеток молочной железы взрослых овец, растущих в культуре тканей.
Я не остановился на достигнутом. Затем я рассказал о значении клонирования, создания новых животных с ядрами, полученными от существующих взрослых животных. Признавая неизбежность того, что внимание общественности будет уделяться в первую очередь «сенсационным аспектам» — возможности создания клонов зрелых людей, — я также указал на потенциальные преимущества в сельском хозяйстве и медицине, которые могут быть получены в результате клонирования животных или создания клонированных людей. клетки. Я сделал наибольший акцент на перспективах «гораздо более глубокого понимания» развития процесса, который определяет, будет ли клетка вести себя как нервная клетка или клетка печени.Я сказал, что рождение Долли продемонстрировало, что «клетка, полученная из молочной железы взрослого человека, была перепрограммирована, чтобы стать. . . полностью мощный. . . чтобы сделать все составляющие овцы ». Изучение правил перепрограммирования, как я утверждал перед подкомитетом, может предоставить неожиданные возможности в медицине — для создания клеток кожи, костного мозга или нейронов из нормальных клеток пациента для лечения ожогов, для замены клеток крови, разрушенных химиотерапией, или для противодействия дегенеративным заболеваниям. заболевания головного мозга.
В заключительной части своего ответа на вопросы Портера я резюмировал аргументы против репродуктивного клонирования человека, которые были разработаны группой NIH по исследованию человеческих эмбрионов.Кроме того, я указал, что ограничения Конгресса (поправка Дики-Уикера) и распоряжение Клинтона уже препятствовали использованию федеральных средств для клонирования людей. В ответ на уточняющий вопрос представителя Ниты Лоуи я сказал, что есть причины «беспокоиться о спешке с принятием законодательства в этой сфере. У нас есть новое открытие. Это нужно усвоить и обсудить. . . . (The) Национальная консультативная комиссия по биоэтике. . . очень хорошо подходит. . . обсудить эти вопросы и дать некоторые рекомендации.
Мое, возможно, было умеренным, аргументированным заявлением, но немедленной реакцией Долли в Вашингтоне и по всей стране был политический импульс — использовать убеждение, моральный авторитет и законодательство для предотвращения или предотвращения создания клонированных человеческих существ. потомство, даже если возможность клонирования человека в целях воспроизводства, вероятно, будет по крайней мере через годы. Белый дом быстро издал распоряжение о снижении вероятности клонирования человека, запретив федеральное финансирование для его оплаты и призвав ученых, имеющих доступ к другим источникам поддержки, соблюдать мораторий на клонирование.
Объявление президента прессе об этом новом постановлении сопровождалось директивой для недавно созданного NBAC, в которой он просил рекомендовать, как реагировать на новые события в долгосрочной перспективе. Мероприятию для прессы предшествовал короткий брифинг с Гарольдом Шапиро (в то время председателем NBAC и президентом Принстонского университета), несколькими советниками президента и мной. Я сидел рядом с президентом и, когда обсуждение подходило к концу, начал объяснять ему, почему методы, приведшие к появлению Долли, имеют потенциальное значение для понимания основных принципов биологии и для производства терапевтически полезных клеток, даже если они не позволят ранний зародыш, чтобы вырасти после очень ранних стадий в чашке Петри.По этим причинам, как я утверждал, к любым усилиям по законодательному регулированию следует относиться с осторожностью, чтобы не перекрыть полезные пути расследования.
Подслушивая мой разговор с Клинтоном, возможно, думая, что я пытаюсь подорвать решимость президента насчет указа, вмешался вице-президент Эл Гор, сказав, что не хочет быть резким, но времени мало, и клонирование имеет значение. требовалось срочное разрешение. Затем, к моему удивлению, он сказал, что клонирование человека, вероятно, уже проводилось где-то еще и что, когда он был в Палате представителей, один из его комитетов услышал свидетельства об успешном клонировании человека в Индии.Не было ни необходимости, ни благоразумия бросать ему вызов на глазах у остальных. Но когда мы собрались на брифинге в Овальном кабинете, он подошел ко мне, извинился за свою резкость во время брифинга и, признав мой скептицизм по поводу его утверждений, сказал, что попросит своих сотрудников прислать мне стенограммы из слух. Меня не удивило, что они так и не приехали.
Новый указ президента и попытки законодательно запретить клонирование людей были более полезными как средство общественного признания, чем как необходимое или эффективное средство сдерживания.В то время мы знали, что репродуктивное клонирование из клеток взрослых животных было маловероятным событием — Долли была единственной успешной из 277 попыток в описанных экспериментах с овцами. Теперь мы знаем, что вероятность успеха также низкая (если иногда немного лучше) у других видов и что животные, полученные путем клонирования, редко, если вообще когда-либо, полностью нормальны: они могут быстро стареть и рано умирать, а их ДНК несет на себе следы процесс клонирования. 10 Таким образом, польза законодательного запрета на клонирование человека осталась неясной.Ответственные ученые не стали бы заниматься клонированием человека в целях воспроизводства из-за его безопасности, этических соображений и трудностей. Решительные преступники просто нарушили бы закон или отправились в одно из многих мест, где таких законов не существовало. Тем не менее, большинство ученых выступают за законодательный запрет (который до сих пор не существует на федеральном уровне), хотя бы для того, чтобы положить конец этой проблеме и продемонстрировать поддержку разумной этической позиции.
Сразу после выхода газеты Уилмута и указа правительства несколько комитетов Конгресса провели слушания, чтобы продемонстрировать озабоченность законом, и многие специалисты по этике, общественные деятели и другие «говорящие головы» заполнили радиоволны и газеты тревогой по поводу клонирования людей.Ровно через две недели после слушаний в Палате представителей (за которыми последовало объявление о рождении Долли через несколько дней) сенатор Билл Фрист организовал слушания в сенатском комитете по здравоохранению и человеческим ресурсам, чтобы обсудить новости, обсудить возможное законодательство и воспользоваться преимуществами Яна Случайный визит Вильмута в Вашингтон. 11 Я выступал вместе с Вильмутом в качестве свидетеля и произнес еще одну пространную беседу о биологическом значении его работы. Для этого случая у меня было достаточно времени, чтобы подготовить рисунки, иллюстрирующие нормальные процессы оплодотворения и раннего развития, и увеличить фотографии, показывающие тонкий процесс переноса ядер и аморфный вид ранних эмбрионов.Опять же, я рассмотрел потенциально полезные виды использования передачи и перепрограммирования ядер, описал уже существующие гарантии против попыток неправомерного использования новой технологии и призвал, чтобы общественное обсуждение предшествовало «усилиям по принятию законов в областях, где проблемы являются сложными».
Но мои попытки отложить принятие закона казались мягкими по сравнению с речью, произнесенной позже на слушаниях сенатором Томом Харкином. Хотя я иногда спорил с Харкиным о финансировании и надзоре за исследованиями в области альтернативной медицины, он был последовательным сторонником фундаментальных исследований и бюджета NIH.В этом случае он поднял свою защиту исследования до неожиданного уровня:
Я не думаю, что есть какие-либо подходящие пределы человеческому знанию — вообще никаких. . . . Некоторые хотят заставить нас поверить, что Долли — «волк в овечьей шкуре», но я так не думаю. Я думаю, что у такого рода исследований есть огромный потенциал для добра. . . . Для таких, как мой друг, сенатор Бонд [который внес строго ограничительный законопроект, запрещающий всю передачу ядерных материалов человеку] и президент Клинтон [который издал указ о блокировании федерального финансирования репродуктивного клонирования человека и потребовал ввести мораторий в частный сектор], которые говорят, стоп, что мы не можем играть в Бога, ну, я говорю, ладно, ладно.Вы можете встать на свою сторону и встать рядом с Папой Павлом V, который в 1616 году пытался остановить Галилея.
Прежде чем закончить свою защиту свободной игры науки, он усилил аргумент еще на одну ступень:
Я сделаю заявление прямо здесь. Клонирование будет продолжено. Человеческий разум будет продолжать исследовать это. Клонирование человека произойдет, и это произойдет при моей жизни, и я этого совсем не боюсь. Я это приветствую. *
Значение Долли: генетическое перепрограммирование
Долли сейчас самая известная овца в истории, и ее рождение считается одним из самых драматических моментов в истории науки двадцатого века.Эксперимент, породивший ее, опроверг существующую догму, в которой утверждалось, что зрелые (дифференцированные) клетки в сложном организме нельзя «перепрограммировать», чтобы они вели себя как оплодотворенная яйцеклетка (зигота), изначальная эмбриональная клетка, которая дает начало целостному организму. Рождение Долли убедило большинство ученых в том, что новый организм, генетически идентичный ранее существовавшему человеку, может быть создан с помощью полного набора хромосом, полученных из специализированной взрослой клетки. В эксперименте Вильмута генетическая программа, которая заставляет клетку вести себя как эпителиальная клетка груди, была заменена генетической программой, реагирующей на сигналы, присутствующие в цитоплазме яйца.Таким образом, клетка, вновь образованная путем переноса ядра, генерировала дочерние клетки, которые в конечном итоге привели к формированию законченного сложного организма.
Что означает перепрограммирование? В предыдущих главах я представил идею о том, что отдельные типы клеток используют только подмножество генов в геноме для производства РНК и белка; набор экспрессируемых генов часто называют программой. Во время нормальной дифференцировки — в процессе развития эмбриона или образования специализированных клеток у животного после рождения — наблюдаются последовательные паттерны экспрессии генов.Как правило, последовательность узоров происходит только в одном направлении. Возможность возврата к более ранней стадии развития («де-дифференциация» или «перепрограммирование») была постоянной темой для дискуссий. Давно признано, что резкое перепрограммирование должно происходить без экспериментального вмешательства во время репродукции, когда две специализированные клетки, сперматозоид и яйцеклетка, объединяются, чтобы произвести зиготу, единственную клетку, из которой возникают все последующие клетки в организме. Клонированное животное по имени Долли показало, что такое резкое перепрограммирование может также происходить, когда ядро полностью дифференцированной клетки перемещается в новую среду, цитоплазму яйца.
Итак, какие молекулярные события контролируют генетическую программу, определяя, остается ли участок ДНК, ген, молчаливым, или считывается для образования РНК и, как правило, белка? И что вызывает эти события? Хотя мы далеки от удовлетворительных ответов на эти вопросы, некоторые вещи очевидны. Для любого типа клеток существует характерный паттерн (или программа) экспрессии генов, при этом некоторые из примерно двадцати двух тысяч генов молчащие, некоторые включаются на низких уровнях, некоторые — на более высоких.Чтобы перейти от одного типа клеток к другому, необходимо изменить активность многих тысяч генов. Как это происходит, не совсем понятно, но часть ответа связана с главными регуляторами, белками, влияющими на поведение большого количества генов, в виде своего рода иерархии.
Чтобы представить себе, как это происходит, представьте себе последствия нажатия («выражения») некоторых клавиш на двенадцатиклавишном пианино. Одна комбинация дает один гармоничный звук; другая комбинация производит другой звук.Изменение звуков потребовало бы изменения в программировании, что было бы относительно легко сделать с таким простым фортепиано. Но если бы инструмент имел гораздо большее количество клавиш, возможно, тысячи, было бы более эффективно управлять изменениями в звуке, создав иерархию, с некоторыми клавишами в качестве регуляторов больших наборов других клавиш. Если нормативные ключи регулируют частичное перекрытие, а не отдельные наборы ключей. ситуация будет похожа на то, что, по-видимому, происходит в клетках животных.
Теперь мы знаем, что представляют собой некоторые из регуляторных генов, мы кое-что знаем о том, какие гены они регулируют, и мы даже немного знаем о том, как они сами регулируются, особенно при нормальном развитии. Рождение Долли и другие эксперименты говорят нам о том, что можно перезагрузить программу, не прибегая к обычному процессу оплодотворения — наблюдения, которые в корне интересны и богаты возможностями. Но какие компоненты цитоплазмы яйца вызвали критические изменения в экспрессии генов, чтобы преобразовать ядро клетки груди в ядро одноклеточного эмбриона? Можно ли добиться того же эффекта во взрослой клетке без трудоемких манипуляций с ядром клетки в новую клетку? Или без яйцеклетки в качестве получателя? Можно ли это сделать с помощью химических триггеров (гормонов или лекарств)? Каким-то физическим потрясением? Или путем доставки в клетку нескольких основных регуляторных генов?
Рождение Долли вдохновило на дополнительные усилия — все более успешные (хотя и относительно неэффективные) — по клонированию нескольких других видов животных (мышей, кошек, собак, лошадей, коров и даже нечеловеческих приматов).Степень успеха клонирования животных можно оценить по текущим дебатам об использовании клонированных животных в пищу в Европе и Соединенных Штатах. 12
Эти успехи стимулировали попытки повторить перепрограммирование другими способами. Наиболее драматично то, что небольшое количество лабораторий использовали ретровирусы, несущие регуляторные гены, для перепрограммирования зрелых клеток, в основном клеток кожи, от мышей, а в последнее время и от человека. 13 Инфицированные перепрограммированные клетки обладают многими чертами эмбриональных стволовых клеток, включая критическую способность образовывать различные типы дифференцированных клеток, такие как мышечные и нервные клетки.«Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки» (iPS-клетки) открыли новые захватывающие перспективы для понимания и лечения болезней, как будет отмечено в конце этой главы.
Как избежать принятия закона о криминализации передачи ядерных материалов
В ответ на продолжающиеся споры о репродуктивном клонировании человека — возможно ли клонирование человека? Это безопасно? Можно ли это когда-нибудь оправдать с этической точки зрения? — большинство ученых заняли консервативную позицию и остались восприимчивыми к законодательному запрету.Это частично основано на доказательствах того, что клонированные животные не совсем здоровы, частично на неэффективности и дороговизне этого процесса, а частично на сложных этических и политических проблемах, возникающих при репродуктивном клонировании. Но рождение Долли также подняло вопрос, по которому большинство ученых занимают позицию, расходящуюся с государственной политикой Соединенных Штатов. Должно ли правительство поддерживать терапевтическое клонирование посредством переноса ядра в яйцеклетку для получения эмбриональных стволовых клеток для лечения серьезных заболеваний?
В этом контексте объявление о рождении Долли было особенно острым.Существование Долли показало, что, в конце концов, как предполагала группа по исследованию эмбрионов человека, можно «повернуть вспять биологические часы» — перезагрузить программу генома клетки взрослого млекопитающего так, чтобы она вела себя как геном взрослого млекопитающего. оплодотворенное яйцо. Эта новая клетка может привести к полному развитию сложного организма. Но перенос ядра также может быть первым шагом к другому, полезному и гораздо менее спорному результату: производству клонированных ранних эмбрионов, из которых могут быть получены клонированные плюрипотентные стволовые клетки.Даже в 1994 году группе по исследованию эмбрионов стало очевидно, что такие клетки могут быть одними из лучших перспектив для клеточной терапии, а также важными инструментами для изучения нормального и аномального развития, для понимания болезней и для скрининга новых препараты для лечения болезней.
Но можно ли сохранить различие между репродуктивными и терапевтическими намерениями? Мои коллеги и я надеялись, что любые законодательные усилия по запрету репродуктивного клонирования человека, сделав его преступным деянием, будут достаточно гибкими, чтобы разрешить перенос ядер для создания клонированных плюрипотентных клеток.Первоначально лишь немногие в Конгрессе, казалось, были озабочены сохранением возможности перепрограммирования человеческого ядра с помощью переноса ядер в качестве метода, который будет способствовать открытиям и методам лечения. Мнение комиссии по исследованию эмбрионов о том, что перенос ядер для создания эмбриональных клеток из ядер взрослых особей является бесполым, терапевтически полезным и этически более приемлемым методом, чем ЭКО, обычно игнорировалось. Законопроект, внесенный в 1997 году сенатором Китом Бондом от Миссури и одобренный сенатором Фристом, сделал бы передачу ядерных материалов незаконной в рамках попытки запретить клонирование людей.Они рассматривали этот метод как первый шаг по «скользкой дорожке» к репродуктивному клонированию. Но благодаря организованному лоббированию со стороны ученых и помощи двухпартийной коалиции законодателей, в том числе, в частности, сенаторов Оррина Хэтча, Арлена Спектера и Тома Харкина, законопроект был заблокирован с небольшим отрывом, что продемонстрировало, как ученые могут положительно повлиять на дебаты по сложные вопросы.
Тем не менее, поскольку общественное знакомство с переносом ядер произошло в контексте рождения Долли, этот метод стал неразрывно связан с клонированием в самом драматическом смысле — созданием клонированных людей.Попытки подчеркнуть, что перенос ядер был лишь ранним шагом в разработанном методе, который может привести к репродуктивному клонированию , но что он также важен для достижения более приемлемой цели «терапевтического клонирования», не увенчались успехом. Например, до сих пор невозможно использовать федеральные фонды для поддержки исследований по переносу ядер, потому что этот метод считается средством создания эмбриона и, таким образом, его поддержка на федеральном уровне нарушит поправку Дики-Уикера. *
Неудивительно, что передача ядерных материалов более активно осуществляется в странах Азии и Европы, особенно в Великобритании. Американские ученые использовали средства от промышленности, государственных инициатив и частной благотворительности для поддержки работ по передаче ядерных материалов, но прогресс неизбежно замедлился из-за исключения NIH, нашего основного источника финансирования исследований и обучения и преобладающего влияния на исследовательские тенденции. В Соединенных Штатах. Тем не менее, воспроизводимого успеха в передаче ядерных материалов человеку еще не удалось добиться ни в одной стране.Кроме того, получение человеческих яйцеклеток для процедуры остается трудным по этическим и медицинским причинам. Новые подходы к репрограммированию, вероятно, превзойдут перенос ядер в качестве предпочтительного метода создания клонированных плюрипотентных стволовых клеток.
Выращивание эмбриональных стволовых клеток человека
Когда Долли появилась на сцене в 1997 году, ученые все еще не знали, как вырастить эмбриональные стволовые клетки из ранних человеческих эмбрионов, несмотря на неоднократно успешное культивирование эмбриональных стволовых клеток мыши.Таким образом, потенциальная медицинская польза переноса ядер и других исследований человеческого эмбриона оставалась теоретической в первые год или два после рождения Долли.
Но споры о клонировании и исследованиях эмбрионов гораздо более остро сосредоточились на перспективах лечения болезней человека в конце 1998 года, когда Джейми Томсон из Университета Висконсина сообщил о продолжительном росте в чашках для культивирования человеческих клеток, полученных из ранних эмбрионов. 14 Для тех, кто внимательно следит за работой Томсона, этот шаг мог быть ожидаемым, поскольку пару лет назад он сообщил о методе выращивания плюрипотентных стволовых клеток, полученных из эмбрионов нечеловеческих приматов. 15 Но для большей части научного сообщества и широкой общественности заявление Томсона об эмбриональных стволовых клетках человека было ошеломляющим.
Чтобы создать свои линии эмбриональных стволовых клеток, Томсон и его коллеги разобрали ранние человеческие эмбрионы, полученные от доноров спермы и яйцеклеток в клиниках ЭКО. * Внезапно стало возможным изучить правила нормального человеческого развития — рецепты, необходимые для превращения ранних эмбриональных клеток, еще не привязанных к какому-либо конкретному типу ткани, в специализированные клетки практически любого типа — в простых экспериментальных системах.Это также означало, что ученые-медики могли сосредоточиться на создании большого количества дифференцированных клеток человека, которые можно было бы использовать для восстановления многих видов поврежденных или больных тканей: дефицит поджелудочной железы у пациента с диабетом, нехватка продуцирующих дофамин клеток в мозгу пациентов. при болезни Паркинсона истощенные клетки сердечной мышцы у пациентов с застойной сердечной недостаточностью.
Успех Томсона в разработке линий эмбриональных стволовых клеток человека, его интерес к их широкому использованию, а также создание других подобных линий в других местах в Соединенных Штатах и за рубежом создали важную возможность.Теперь, когда такие линии были созданы без использования федеральных средств, не было никаких очевидных препятствий для использования федеральных средств для поддержки исследований самих линий. Поскольку работа с вновь полученными стволовыми клетками не будет нанесена человеческим эмбрионам в дальнейшем, не было оснований полагать, что федеральное финансирование исследования нарушит поправку Дики-Уикера. Тем не менее, были основания опасаться, что трата федеральных денег на изучение клеток, полученных путем уничтожения человеческих эмбрионов, спровоцирует негативную реакцию Конгресса против NIH.
По этой причине в начале 1999 года я попросил Харриет Рэбб, в то время главного юрисконсульта Департамента HHS (ныне главу юридического отдела Университета Рокфеллера), дать подробное юридическое заключение. В широко известном брифинге она утверждала, что, поскольку стволовые клетки сами по себе не являются эмбрионами, их исследования могут быть законно поддержаны средствами NIH. 16 Ни один эмбрион не будет поврежден при этом; ущерб уже был причинен юридически за счет нефедеральных средств. Это послужило основой для финансирования исследований эмбриональных стволовых клеток человека за счет долларов NIH.Но нам нужны были и другие гарантии. Поэтому я набрал группу во главе с Ширли Тилгман, молекулярным биологом и эмбриологом мышей, которая сейчас является президентом Принстонского университета, для написания руководящих принципов по регулированию этического использования таких клеток в исследованиях, финансируемых Национальным институтом здравоохранения. Однако к тому времени, когда ее группа завершила свой отчет, запросила комментарии общественности и ответила на них, а также опубликовала правила, президентские кампании 2000 года были в самом разгаре, и политическая чувствительность к этому вопросу была острой.(К тому времени я уже уволился из Национального института здоровья).
Стволовые клетки в эпоху Джорджа Буша
Какими бы ни были объяснения, деньги Национального института здоровья не использовались для оплаты исследований человеческих эмбриональных стволовых клеток, пока президент Буш не дал свое знаменитое письмо. речь от 9 августа 2001 года. Показателем важности дебатов о стволовых клетках на политической арене является то, что эта тема стала темой первого телеобращения нового президента к нации, почти восемь месяцев спустя после того, как он вступил в должность. Речь была хорошо написана, и ее попытка осчастливить все стороны была умной по замыслу; но его очевидные преимущества были обречены на недолгое время. * Вместо того, чтобы закрыть дверь для любого федерального финансирования исследований стволовых клеток, как многие предсказывали, Буш согласился позволить использовать средства для изучения только тех линий, которые существовали до того, как он начал говорить в девять часов вечера. Эта политика позволила ему сказать своим правым сторонникам, что перспектива федерального финансирования не может быть стимулом для получения дополнительных линий из дополнительных эмбрионов, а также сказать ученым-медикам, что он разрешает федеральную поддержку исследований с существующими линиями человеческого тела. эмбриональные стволовые клетки впервые.
Политика Буша, бесспорно, разрешила первое федеральное финансирование исследований эмбриональных стволовых клеток человека. Исходя из консервативного президента, политика была менее подвержена нападкам со стороны правого крыла, чем аналогичные действия со стороны демократа; тем не менее многие из его сторонников выразили разочарование. Но, как и ожидалось, его компромисс быстро вышел за пределы полезности. Количество клеточных линий, подходящих для финансирования, всегда было намного меньше, чем шестьдесят или более заявленных о существовании. Это было правдой отчасти потому, что речь объединяла действительно установленные клеточные линии, демонстрирующие надежные свойства, с замороженными образцами дезагрегированных эмбриональных клеток, которые еще не продемонстрировали воспроизводимые модели роста в культуре.Кроме того, некоторые линии было трудно получить из-за лицензионных требований тех, кто подал заявку на патентную защиту своих клеточных линий. Более того, ни одна из существующих клеточных линий, вероятно, не могла быть полезной для конечной цели терапии, потому что они изначально размножались на «поддерживающих» слоях мышиных клеток, которые могли продуцировать вирусы, опасные для пациентов. Тем временем новые и более совершенные линии стволовых клеток были созданы за счет средств из нефедеральных источников, в основном из Медицинского института Говарда Хьюза, частных благотворительных организаций, зарубежных лабораторий и промышленности.Но эти линии не могут быть изучены с помощью грантов NIH, если закон о расширении репертуара подходящих клеточных линий — закон, дважды принятый Конгрессом США и дважды наложенный вето президентом Бушем, — не вступит в силу. Это кажется маловероятным до выборов 2008 года.
За годы адаптации к политике Буша в отношении стволовых клеток ситуация изменилась в результате появления знающих и преданных делу групп по защите стволовых клеток, важных открытий о поведении стволовых клеток. эмбриональные стволовые клетки, а также новые стратегии привлечения правительств штатов и филантропов к исследованиям стволовых клеток.В результате исследования стволовых клеток не сильно отстали от аналогичных усилий в других странах, как опасались некоторые, хотя прогресс, несомненно, был поставлен под угрозу из-за юридических и бюрократических препятствий. В этой области исследований традиционная сила американской политики в области науки — централизованный, хорошо скоординированный и открытый конкурентный процесс предоставления грантов в NIH — была заменена неравномерным лоскутным одеялом государственных программ и других возможностей негосударственного финансирования . Некоторые богатые учреждения смогли продолжить исследования стволовых клеток человека за счет благотворительности, в то время как многие другие не имеют доступа к таким ресурсам.Некоторые штаты ввели запреты как на клонирование, так и на методы, используемые для клонирования (например, перенос ядер соматических клеток), в то время как другие, наиболее известная из которых Калифорния, приняли меры для щедрого финансирования многих видов исследований стволовых клеток человека.
Больше калифорнийцев поддержали инициативу штата по исследованию стволовых клеток в 2004 году, чем проголосовали за кандидата в президенты от Демократической партии Джона Керри. Законопроект предусматривает предоставление облигаций на сумму 3 миллиарда долларов сроком на десять лет для исследования стволовых клеток. Тем не менее, препятствия, возникшие из-за разногласий в законодательстве и юридических проблем, значительно задержали расходование средств налогоплательщиков.Другие штаты, особенно Коннектикут, Нью-Джерси, Висконсин и Мичиган, приняли прогрессивные политики, обеспечивающие финансовую поддержку исследований стволовых клеток. В 2007 году, после избрания Элиота Спитцера губернатором, мой штат, Нью-Йорк, выделил не менее 600 миллионов долларов на исследования стволовых клеток и связанные с ними исследования в течение следующего десятилетия, не привлекая особого внимания или возражений. * Между тем частные деньги, такие как 50 миллионов долларов, выделенных Фондом Старра для поддержки совместной работы по стволовым клеткам в MSKCC, Университете Рокфеллера и Медицинском колледже Вейл Корнелл, поддерживают широкие программы науки о стволовых клетках во многих ведущих университетах США.С. исследовательские центры — по крайней мере, в тех, кому посчастливилось иметь богатых, просвещенных доноров.
Тем не менее, несмотря на альтернативные способы финансирования исследований стволовых клеток, исследователи должны тщательно обдумать, хотят ли они работать в такой запутанной в финансовом отношении (если увлекательной с научной точки зрения) области и, если да, то где им следует работать. Например, хотя немногие ученые еще покинули Соединенные Штаты, чтобы продолжить исследования стволовых клеток за рубежом, другие страны предлагают нашим ученым соблазны.Соединенное Королевство обратилось к парламентскому комитету с просьбой определить, какие исследования следует разрешить, а затем выпустило руководящие принципы, которые напоминают рекомендации комиссии по исследованию эмбрионов Национального института здоровья в 1994 году. Другие европейские и некоторые азиатские страны активно продвигают исследования стволовых клеток, чувствуя не только возможности для открытий и медицинского прогресса, но и шанс опередить сбитые с толку американские предприятия на этой арене. Наиболее очевидно, что это имело место в Южной Корее, где большая, хорошо поддерживаемая команда, возглавляемая профессором Ву-Сук Хван, сообщила о том, что применила перенос ядер соматических клеток до такой степени, что эмбриональные стволовые клетки были получены из ядер пациентов с травмами и заболеваниями. которые могут быть подходящими кандидатами для клеточной терапии.К сожалению, сейчас признается, что большая часть работы доктора Хвана была сфабрикована, и это признание сильно запятнало репутацию всей области. 17
Для меня и многих моих коллег то, как наше правительство решило драматические события в исследованиях эмбрионов и стволовых клеток, отражает чрезмерное влияние нескольких религиозных групп на поведение науки в разнообразном обществе. . Противодействие католической церкви и других консервативных христиан этой новой научной арене было непрекращающимся, что нашло отражение в позициях, занятых некоторыми ведущими представителями законодательной и исполнительной ветвей власти, включая президента Буша, сенатора Сэма Браунбэка и представителя Дейва Велдона. из которых предложили или одобрили строго ограничительное законодательство.Немногие аргументы могут показаться ученым-медикам столь же оскорбительными, как утверждение, что мы этически безответственны, когда трудимся над извлечением стволовых клеток из пожертвованных ранних человеческих эмбрионов, которые в противном случае были бы уничтожены, и использовали их в полезных, потенциально спасающих жизнь целях.
Но есть и поводы для оптимизма. Страна серьезно относится к дебатам о стволовых клетках и клонировании, и большинство показателей указывают на растущую поддержку либерализации существующей политики. Во-вторых, эти проблемы еще больше стимулировали интерес общественности к современной биологии и ее медицинскому потенциалу.В-третьих, недавняя работа в Японии и США дает основания для оптимизма в отношении того, что клетки, очень похожие на эмбриональные стволовые клетки, iPS-клетки, могут быть получены путем введения «генетического коктейля» во взрослые клетки, тем самым перепрограммируя их. *
Если изучение перепрограммирования клеток продолжит оправдывать свои ожидания, человеческие клетки, наиболее желательные для исследований и лечения, в конечном итоге могут быть получены без использования эмбрионов или переноса ядер. Это осуществит давнюю мечту о повторном развертывании зрелых клеток, которые будут вести себя как эмбриональные клетки, а затем использовать эти клетки для лечения пациентов, от которых эти клетки были получены.Однако в обозримом будущем ранние человеческие эмбрионы и полученные из них клетки станут основным элементом исследований, обеспечивая «золотые стандарты», с которыми необходимо сравнивать перепрограммированные клетки. Отсутствие абсолютных запретов на исследования эмбрионов и стволовых клеток позволило таким исследованиям продолжаться в этой стране, хотя и не оптимальным образом, несмотря на ограничения на федеральное финансирование. Благодаря своим обещаниям, эмбриональные стволовые клетки стали полезным политическим лидером и сдержали обещание биомедицинских исследований в авангарде общественного обсуждения.В целом неплохие результаты.
- *
Такие ткани обычно получают с согласия родителей после абортов под медицинским наблюдением, выполненных примерно через два-четыре месяца после зачатия.
- *
Трое ученых, разработавших методы создания целевых мутаций у мышей, получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине 2007 года.
- **
Важно отметить, что комиссию не просили вынести решение о том, следует ли вообще проводить определенные виды экспериментов, как это могло бы иметь место в Соединенном Королевстве и других европейских и некоторых азиатских странах. наций.В этих странах государственная политика, регулирующая проведение исследований, распространяется на все работы, независимо от источника финансирования. В Соединенных Штатах традиция диктует, что научная работа обычно не считается запрещенной или незаконной; лишь изредка научная работа объявлялась вне закона и подвергалась гражданскому или уголовному преследованию. Вместо этого определенные виды спорной работы могут быть признаны неприемлемыми для использования средств налогоплательщиков, обычно федеральных. Несмотря на ограничения на государственное финансирование, такая работа может проводиться за счет частных денег или незапрещенных государственных средств, как это недавно произошло с исследованиями стволовых клеток эмбриона человека.
- *
Члены группы — и я — также получили буквально тысячи почти идентичных открыток, в которых говорилось, что мы не поощряем исследования ранних эмбрионов, потому что они были невинными людьми.
- *
Более подробный отчет об этих драматических событиях можно найти в книге Merchants of Immortality выдающегося историка науки Стивена С. Холла. 7
- *
Этот необычный момент был позже включен в эпизод популярного телесериала The X Files .Мое эпизодическое появление повысило мой авторитет среди друзей и родственников в возрасте до двадцати пяти лет.
- *
Никакие штрафы не связаны с такими исследованиями, проведенными в Соединенных Штатах с другими источниками финансирования.
- *
Чтобы обойти поправку Дики-Уикера, запрещающую федеральное финансирование исследований, уничтожающих человеческие эмбрионы, группа Томсона использовала деньги из двух нефедеральных источников: Исследовательского фонда выпускников Висконсина, государственного фонда, финансируемого за счет благотворительности и роялти. из более ранних исследований, проведенных в университете и Geron Corporation, частной компании, занимающейся проблемами старения.Эти стратегии финансирования предвосхитили модель, которая сейчас преобладает перед лицом продолжающихся жестких ограничений на федеральную поддержку исследований человеческих эмбрионов и стволовых клеток — финансирование из благотворительных фондов, коммерческих инвестиций, частных исследовательских организаций и государственных бюджетов.
- *
Согласно статье Джея Лефковица, одного из политических советников Буша в то время, в январском выпуске журнала Commentary за январь 2008 года, президент посвятил большую часть своих первых месяцев пребывания в должности обсуждениям. по этому вопросу со многими врачами, учеными, специалистами по этике, защитниками интересов пациентов и другими.Однако утверждение Лефковица о том, что я «сел» с президентом Бушем в Йельском университете, чтобы поговорить о стволовых клетках, является преувеличением, которое ставит под сомнение другие утверждения в статье. Фактически, я встретился с президентом в очереди на выпускной в 2001 году в Йельском университете, где мы оба получали почетные ученые степени. Когда я удивил его, сказав, что я хотел бы поговорить о трех вещах, одна из которых была о стволовых клетках, он выглядел обеспокоенным и крикнул Эндрю Карду, руководителю своего штаба: «Энди, Энди, подойди сюда и поговори. в документ! » Кард и я затем коротко обсудили мои взгляды.Я никогда не садился с президентом Бушем, чтобы обсуждать стволовые клетки или что-то еще.
- *
В сентябре 2007 года я был назначен уполномоченным в подкомитете по финансированию Нью-Йоркской программы стволовых клеток.
- *
На текущих ранних стадиях разработки этих новых средств перепрограммирования клеток комбинация введенных генов включает некоторые из них, которые могут вызывать рак. Кроме того, средством доставки являются ретровирусы, которые встраивают провирусы в хромосомы клеток с потенциально опасными эффектами, как описано в части 2.Сейчас усиленно предпринимаются попытки найти другие способы репрограммирования клеток — с другими генами, с другими средствами доставки и с другими химическими и физическими сигналами для изменения экспрессии генов.
- 1
Эдвардс Р.Г., Бавистер Б.Д., Steptoe PC. Ранние стадии оплодотворения in vitro ооцитов человека, созревших in vitro. Природа. 1969, февраль, 15221: 632–35. [PubMed: 4886881] Steptoe PC, Эдвардс Р.Г. Рождение после реимплантации человеческого эмбриона. Ланцет. 1978 Август.12312: 366. [PubMed: 79723]
- 2
- 3
Пальмитер Р.Д., Бринстер Р.Л. Трансгенные мыши. Клетка. 1985; 41: 343–45. [PubMed: 2985274]
- 4
Капеччи MR. Нацеливание на гены у мышей: функциональный анализ генома млекопитающих в двадцать первом веке. Природа Обзоры Генетики. 2005 июнь; 6: 507–12. [PubMed: 15931173]
- 5
Национальные институты здоровья. Отчет комиссии по исследованию эмбрионов человека.27 сентября 1994 г.
- 6
Гурдон Дж. Б., Ласки Р. А., Ривз Орегон. Возможности развития ядер, пересаженных из ороговевших клеток кожи взрослых лягушек. Журнал эмбриологии и экспериментальной морфологии. 1975, 34 августа (1): 93–112. [PubMed: 1102625]
- 8
Колата Г. Ученый сообщает о первом в истории клонировании взрослого млекопитающего. Газета «Нью-Йорк Таймс. 23 февраля 1997 г. с. А1. [PubMed: 11647202] Вилмут И., Шниеке А.Е., МакВир Дж., Кинд А.Дж., Кэмпбелл К.Х. Жизнеспособное потомство, полученное из клеток плода и взрослых млекопитающих.Природа. 1997, февраль, 27385: 810–13. [PubMed:
- 11]
- 9
Слушания в Подкомитете министерств труда, здравоохранения и социальных служб, образования и связанных с ними агентств, Комитета по ассигнованиям, Палаты представителей. 26 февраля 1997 г. С. 13–18.
- 10
Hochedlinger K, Jaenisch R. Ядерная трансплантация, эмбриональные стволовые клетки и потенциал клеточной терапии. Медицинский журнал Новой Англии. 17 июля 2003 г., 349: 275–86.[PubMed: 12867612]
- 11
Слушания в Подкомитете по общественному здоровью и безопасности, Сенатскому комитету по труду и кадрам, биомедицинским исследованиям. 1 мая 1997 г.
- 12
Замок Южной Европы не поддерживает молоко и мясо клонов. Газета «Нью-Йорк Таймс. 25 июля 2008 г.
- 13
Такахаши К., Танабе К., Охнуки М., Нарита М., Ичисака Т., Томода К., Яманака С. Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами.Клетка. 2007; 131: 861–72. [PubMed: 18035408] Окита К., Ичисака Т., Яманака С. Генерация плюрипотентных стволовых клеток, компетентных в зародышевой линии. Природа. 19 июля 2007 г., 448: 313–17. [PubMed: 17554338] Ю. Дж., Водяник М. А., Смуга-Отто К., Антосевич-Бурже Дж., Френ Дж. Л., Тиан С., Ни Дж., Джонсдоттир Г. А., Руотти В., Стюарт Р., Слуквин И. И., Томсон Дж. А.. Индуцированные линии плюрипотентных стволовых клеток, полученные из соматических клеток человека. Наука. 2007 г., декабрь 213 18: 1917–20. [PubMed: 18029452]
- 14
Томсон Дж., Ицковиц-Элдор Дж, Шапиро С.С., Вакниц М.А., Свиергиль Дж. Дж., Маршалл В.С., Джонс Дж. М..Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцист человека. Наука. 1998, ноябрь 6282: 1145–47. [PubMed: 9804556]
- 15
Томсон Дж. А., Калишман Дж., Голос Т. Г., Дурнинг М., Харрис С. П., Беккер Р. А., Хирн Дж. П. Выделение линии эмбриональных стволовых клеток приматов. Труды Национальной академии наук США. 1995 август 92: 7844–48. [Бесплатная статья PMC: PMC41242] [PubMed: 7544005]
- 16
- 17
Hwang WS, Roh SI, Lee BC, Kang SK, Kwon DK, Kim S, Kim SJ, Park SW, Kwon HS, Lee CK, Lee JB, Kim JM, Ahn C, Paek SH, Chang SS, Koo JJ, Yoon HS , Hwang JH, Hwang YY, Park YS, Oh SK, Kim HS, Park JH, Moon SY, Schatten G.Эмбриональные стволовые клетки, специфичные для пациента, полученные из бластоцист SCNT человека. Наука. 2005 17 июня; 308: 1777–83. Исправление в Science 310 (16 декабря 2005 г.): 1769; Опровержение Д. Кеннеди, в Science 311 (20 января 2006 г.): 335. [PubMed: 15
6] Уэйд Н., Санг-Хун С. Исследователь сфальсифицировал доказательства клонирования человека, сообщают корейцы. Газета «Нью-Йорк Таймс. 10 января 2006 г.
- 7
Холл Стивен С. Торговцы бессмертием: в погоне за мечтой о продлении человеческой жизни.Нью-Йорк: Хоутон Миффлин; 2003. С. 104–22.
Реалистичный рисунок животной клетки — Novocom.top
Рев рев PNG изображения
Комплекс Гольджи. Векторное изображение: 63062440
.Морда волка, Морда волка Прозрачный БЕСПЛАТНО для скачивания
Снимок экрана 2020 01 22 at 5 47 09 AM
Скачать вектор почтовая марка Бразилии Ара ара птица
adobeaero
Графическая сеть
клетка животное рисунок эскиз карандашом линии рисунки эскизы завод типичный раскраска визит
клетка животное рисунок простой класс клетки наука основные растения естественные рисунки типичный рисунок наука этикетки структура gr9 mstworkbooks za units
клетка животное раскраска печать рисунок наука биологические пульпы предыдущий
клетки животных рисовать рисунок эскиз биология легкий класс аккуратная наука 7-е схемы рисунки животные клетки карандашные наброски шаги полное руководство
клетка животное рисунок легко типичные рисунки деталь живопись долина pngkey
клетка животных диаграмма помечены пустой рисунок немаркированный биология тимвандевалл завод печатные формы тим наука клетки рабочий лист рисунки получить рисунки клипарт анатомия
клетка животное структура рисование наука биология студент биологический оркестр кафедры организация ib предыдущий
клетки животных клетки эскиз рисунок структура класс основные эукариотические растения единицы метка части человеческая диаграмма его органеллы пятая функция живопись долина
клетка животное диаграмма проект клетки наука растение схемы для печати детали класс функции биологии 5-й младший проекты стены ремесло классjr woojr
клетка животных диаграмма рисунок иллюстрация, показывающий алами вектор животные прион энциклопедия getdrawings ядро
клетка животное диаграмма структура ядра части анатомия ретикулум эндоплазматический гладкий рисунок митохондрии цитоплазма Гольджи иллюстрация аппарат грубая центросома вектор мембрана
клетка животное рисовать рисунок простые митохондрии клетки хлоропласты контраст сова
клетка животное диаграмма иллюстрация рисунок цвета алами пчела
заметки рубрики клетка зоотехника рисование роллинз
рисование клеток животных простая схема рисовать пошаговые рисунки живопись долина учебник для начинающих exatin info
рисунок клетки животных
клетка животное рисовать рисунок схема шаг получить рисунки рисунки живопись долина exatin информация
Рисование структуры клеток животных Простое деление клеток цитоплазмы диаграммы для науки о растениях рост в рамках научных моделей
клетка животное рисунок клетки диаграмма органеллы факты биология функции цитозоля наука презентация слайды биологические интересы мог бы другие ppt powerpoint
животные клетки растительные клетки рисовать модели шаг строить бумажные шаги
диаграмма ячеек простой животное пустой файл svg метки без общих пикселей Викимедиа клип клипарт номинально КБ вики
клетка рисунок животное простой растение печень рисовать клетки рисунки получить рисунки живопись долина
клетка мультфильм рисовать клипарт клипарт лучшие человеческие клетки простой рисунок ядерная мембрана наука
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера на прием файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
посещений MedVet для помощи с гривистыми волками — Центр дикой природы Fossil Rim
Посещение MedVet для помощи с гривистыми волками
BloggerTye Chandler:Хотя ветеринары Центра дикой природы Fossil Rim Dr.Джули Свенсон и доктор Холли Хафеле усердно работают, заботясь о лучших интересах примерно 1100 животных парка, они всегда ценят квалифицированную помощь из внешних источников.
В середине июня сотрудники медицинского и онкологического центров MedVet для домашних животных приехали из Виноградной лозы, где проходили обследование двух гривистых волков.
Ветеринарный врач Пейдж Харрельсон интубирует гривистого волка Мак. Трубка помещается в трахею и присоединяется к аппарату, подающему анестезирующий газ.«Холли и я были почти уверены, что эти гривистые волки имеют дело с проблемами желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), но это главным образом потому, что у них были некоторые доказательства срыгивания во дворе», — сказал Свенсон. «Гривистый волк очень часто страдает заболеваниями желудочно-кишечного тракта, особенно воспалительными заболеваниями кишечника. Мы думаем, что это может быть связано с тем, что это животное не очень генетически разнообразно в пределах своей небольшой популяции. Мы не подозревали, что это проблема только потому, что они худые, хотя это был один из видимых признаков.”
Хранитель хищников на ископаемом ободе Джейсон Ахистус указал, что во дворе их дома были обнаружены фекалии, содержащие непереваренную пищу.
Пятно выбривается, чтобы получить лучшее ультразвуковое изображение брюшной полости. Шерсть гривистого волка очень пушистая и густая, поэтому на УЗИ не получится получить хорошее изображение, пока не будет получен лучший контакт с кожей.«Это редкость, когда мы обнаруживаем непереваренную пищу в фекалиях, как Джейсон», — сказал Свенсон. «Таким образом, это в сочетании с срыгиванием и худотой — это слишком много факторов, указывающих на проблемы с желудочно-кишечным трактом.”
Свенсон упомянул знакомство с MedVet компании Grapevine.
«Мы работали с ними по другим случаям, особенно с доктором Эрикой Пикенс, специалистом по внутренним болезням», — сказал Свенсон. «Она всегда была готова жертвовать своим временем. Если у нас есть что-то, для чего требуется много оборудования, анестезии или лекарств, мы всегда предлагаем за это заплатить. Что касается ее времени, усилий и использования своего оборудования, Эрика часто очень щедра и жертвует их нам.
«В противном случае это могло бы оказаться очень дорогим.Такие отношения, в которых они готовы помочь, — это замечательно для нас с точки зрения бюджета ».
Доктор Эрика Пикенс, специалист по внутренним болезням MedVet, исследует печень и желчный пузырь гривистого волка во время ультразвукового исследования. На заднем плане доктор Холли Хафеле берет образцы крови из яремной вены. Это желаемое место для рисования большинства животных в Fossil Rim, потому что оно обеспечивает легкий доступ.Пикенс ранее помог Ископаемому Ободу с двумя коати и двумя гепардами.
Хотя сотрудники MedVet привезли собственное оборудование, это было не самым важным аспектом.
«На самом деле у нас есть собственное эндоскопическое отделение и хороший ультразвуковой аппарат, поэтому во время посещения MedVet ключом для нас является опыт Эрики», — сказал Свенсон. «Помочь ей запустить оборудование — это полезно, потому что внутренняя медицина — это то, чем она занимается изо дня в день. Она будет намного лучше определять мелкие детали и мелкие изменения, чем мы, поскольку мы делаем все понемногу каждый день.
Температура гривистого волка контролируется ректально, что характерно для большинства видов Fossil Rim.«Прицел направлен на верхнюю часть двенадцатиперстной кишки или первый отдел тонкой кишки. Эндоскопия верхних отделов ЖКТ — довольно стандартная процедура среди животных и людей ».
Гривистый волк «Мак» и самка «София» были доставлены в клинику отдельно для прохождения процедуры. После того, как волку сделали анестезию и интубировали, сотрудники MedVet сбрили часть густой пушистой шерсти на брюшной полости, чтобы создать пятно для ультразвукового исследования.
«Шерсть гривистого волка очень длинная, поэтому ультразвуковое исследование не позволяет получить хорошее изображение», — сказал Свенсон. «После бритья вы значительно лучше соприкасаетесь с зондом на реальной коже для лучшего изображения брюшной полости».
Красное свечение исходит от света эндоскопа, и это тот цвет, потому что он светит через мышечный слой. Выбритое пятно заканчивается справа у края грудной клетки.Пока Пикенс проводил УЗИ, Хефеле брал образцы крови. Температуру волка контролировали ректально, что характерно для большинства видов Fossil Rim.
Пока сотрудники MedVet готовились к эндоскопии, ветеринарная учительница Fossil Rim Пейдж Харрельсон получила ценный опыт использования ультразвука Fossil Rim.
Ветеринарный врач Пейдж Харрельсон получает ценный опыт использования аппарата УЗИ. Персонал MedVet готовился к эндоскопии, так что это был идеальный момент для нее.«Вся процедура была ценным опытом для Пейдж, — сказал Свенсон. «Это довольно распространенная процедура в медицине домашних животных, поэтому большинство учеников видели ее в школе.Возможность затем применить его к экзотическим видам и увидеть, насколько процедура похожа, даже среди разных видов, помогает ей экстраполировать информацию, которую она знает, и применять ее к видам, которых она не знает ».
Пока MedVet выполняла эндоскопию, команда Fossil Rim контролировала жизненно важные органы на предмет анестезии, взяла образец мочи для проверки системы мочевыводящих путей волка и только во время процедуры биопсии десневой ткани во рту Мака. Они также брали кровь по разным причинам, в том числе помогали советнику по питанию Программы выживания гривистых волков (SSP), который запросил образцы.
Сотрудники MedVet следят за прицелом, когда он попадает в желудочно-кишечный тракт. В прицел помещены щипцы для биопсии, которые выдвигаются для взятия образца ткани для биопсии.Хафеле вращал образцы крови в центрифуге, готовясь отправить некоторые из них в зоопарк Генри Дурли в Омахе.
«Зоопарк сделал запрос на исследование, чтобы мы получили дополнительные образцы крови гривистого волка для их проекта», — сказал Свенсон. «Это хорошо, потому что большинство зоопарков и центров дикой природы очень тесно сотрудничают в том, что касается исследований.Поскольку у нас были эти волки под наркозом с легким доступом к образцам, мы воспользовались возможностью собрать их и поделиться с исследователями ».
Анализ крови, сделанный в ветеринарной клинике Fossil Rim, является важным аспектом для ветеринарного отделения. В то время как Хафеле в этот день заменяла ветеринарного техника Бренду Кордову, по оценкам Кордовы, до 35% ее работы связаны с лабораторными работами, связанными с кровью.
Доктор Джули Свенсон берет биопсию десны над зубом гривистого волка «Мак».«Мы действительно отправляем некоторые из наших образцов на тестирование, в отличие от Бренды, тестирующей все на месте, но она все еще должна их подготовить — превратить кровь в плазму или сыворотку, упаковать ее и заполнить большим количеством оформление документов для различных учреждений », — сказал Свенсон.
Говоря об испытаниях, ветеринары позже получили известие, что эти гривистые волки просто имеют дело с проблемами желудочно-кишечного тракта, которые не являются редкостью для этого вида.
«Мы ждали результатов образцов биопсии (взятых во время эндоскопии), которые подтвердили диагноз их желудочно-кишечного тракта», — сказал Свенсон.«Все тесты, которые мы проводили, показывают, что в остальном у них хорошее здоровье».
— Тай Чендлер, сотрудник по маркетингу
Это самая большая из центрифуг, которые Fossil Rim использует для замедления проб крови, поэтому она может приготовить большинство проб за один раз. Ветеринарный персонал выбирает создание сыворотки или плазмы. Если антикоагулянт добавлен до того, как кровь отойдет, она станет плазмой. Если он сворачивается, он становится сывороткой. Для большинства млекопитающих сыворотка готовится в Fossil Rim, но это зависит от проводимого тестирования. Доктор Холли Хафеле маркирует пробирки с образцами крови для запроса на исследование, сделанного зоопарком Генри Дурли, членом C2S2, расположенным в Омахе. Пробирки с синим верхом должны быть отправлены в зоопарк Генри Дурли для исследования. Слайды представляют собой мазки крови гривистого волка «Мак» с добавлением антикоагулянта. Они представляют собой один слой клеток и используются для общего анализа крови. Каждая цветная трубка имеет разное предназначение, поскольку это часть системы, в которой хорошо разбирается ветеринарный отдел.Wolf Cell Тендеры, запросы предложений и государственные контракты
66—
Wolf Cell SorterТип: Уведомление о торгах
Срок: 23 июля 2021 г. (1 день назад)
Размещено : 10 дней назад
Начато: 14 июл, 2021 (10 дней назад)
FOB Пункт назначения будет WEST POINT, NY 10996 Конечному пользователю MICC требуются следующие товары, фирменное наименование или равноценные: LI 001: Должен быть сортер / цитометр WOLF 488 нм Cell (номер по каталогу 120488) или аналогичный.Система должна быть микрогидравлическим сортировщиком с ячейками , обеспечивающим давление пробы не более 2 фунтов на квадратный дюйм. В качестве источников возбуждения он должен использовать диодный лазер 488 нм 30 мВт.
От кого: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
NanoCellect
WOLF Сортировщик ячеек и N1 Диспенсер ячеекТип: Уведомление о торгах
1 9031 месяцев назад)
Размещено: 3 месяца назад
Начато: 31 мар, 2021 (3 месяца назад)
NanoCellect WOLF Cell Sorter and N1 Cell Dispenser Код обслуживания продукта: — 6640 — ЛАБОРАТОРНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И ПРИНАДЛЕЖНОСТИ Код НАИКС: — 541714 — Исследования и разработки в области биотехнологии (кроме нанобиотехнологии) Основное контактное лицо: — Максвелл, Дороти Л. [email protected] Телефон 301-827-7729 Дополнительный контактный пункт: —
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
NANOCELLECT
WOLF CELL СОРТЕР И N1 CELL ДИСПЕНСЕРТип: 931 Контракт Июн, 2021 (24 дня назад)
Размещено: 3 месяца назад
Начат: 07 апр, 2021 (3 месяца назад)
NANOCELLECT WOLF CELL СОРТЕР И N1 CELL DISPENSER Идентификатор ходатайства / идентификатор закупки: 75N92021Q0083 Окончательная дата завершения: среда, 30 июня 17:00:00 GMT 2021
От: Федеральная система данных о закупках (Федеральная)
Национальный институт стоматологических и черепно-лицевых исследований
Тип: Уведомление о торгах
Срок сдачи: 11 сентября 2017 г. (около 3 лет назад)
Размещено: около 3 лет назад
Начато: 31 августа 2017 г. (около 3 лет назад)
Добавлен: 31 августа 2017 г. 7:13 am Национальному институту стоматологических и черепно-лицевых исследований (NIDCR) требуется сортировщик ячеек и дозатор ячеек , эквивалентный Nanocellect Biomedical, Inc. WOLF Cell Sorter and N1 Single- Cell Dispenser как общий инструмент для Combined Technical Research Core (CTRC) / NIDCR
From: Federal Government (Federal)
Тип: Награда
Срок сдачи: 08 мая 2019 г. (около 2 лет назад)
Размещено: около 2 лет назад
Начато: 17 мая 2019 г. (около 2 лет назад)
., для приобретения WOLF Cell Sorter и N1 Single- Cell Dispenser. Не существует другого известного сортировщика с ячейками , который отвечал бы требованиям правительства по использованию микрожидкостного, двухстороннего, одноэлементного покрытия с ячейками . Кроме того, этот продукт взаимодействует с текущими системами, используемыми на предприятии, и необходим для совместимости и преемственности с текущими проектами.
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Служба технического обслуживания Nanocellect
Тип: Уведомление о торгах
Срок: 04 сен, 2020 (10 месяцев назад)
Размещено: 10 месяцев назад
Начато: 29 авг, 2020 (10 месяцев назад)
Контракт на техническое обслуживание исследовательских инструментов сортировщика Nanocellect Wolf и N1 Cell .
От кого: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Тип: Уведомление о тендере
Срок сдачи: 2 18 сентября 2018 г. лет назад)
Размещено: около 2 лет назад
Начато: 11 сен, 2018 (около 2 лет назад)
Крайне важно изолировать положительные (флуоресцентные) клеток от отрицательных для генерации полезные линии репортерных клеток.Заявление о необходимости и цели: Целью данного приобретения является приобретение сортировщика клеток , чтобы обеспечить восстановление жизнеспособных клеток после сортировки одиночных клеток на основе выраженной трансгенной флуоресценции. следующее торговое название (Nanocellect Wolf Cell Sorter) или аналогичное Cell
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Маленькая ячейка
Сортировщик с одной ячейкой Диспенсер Тип: Уведомление о торгах
Срок сдачи: 18 июня 2018 г. (около 3 лет назад)
Отправлено: около 3 лет назад
Начато: 7 июня 2018 г. (около 3 лет назад)
Подрядчик должен снабдить NIH NGB Wolf Cell Sorter Sorter with N1 Single Cell Dispenser, Cat.# W-BPro1 или Equal Сортировщик с ячейками с одним диспенсером с ячейками , который соответствует следующим спецификациям: 1. Должен допускать лабораторную изоляцию флуоресцентно меченных клеток с использованием стерильной микрофлюидной технологии. Должен допускать одиночную обшивку элемента 3. Должен уметь дозировать ячеек в известном объеме 4.
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Wilson
Wolf / G-Rex 500M-CS Газопроницаемая ячейка Устройство для культивированияТип: Уведомление о заявке
Срок сдачи: , 2019 (около 2 лет назад)
Размещено: около 2 лет назад
Начато: 03 апр, 2019 (около 2 лет назад)
Использование колбы для культивирования G-Rex от Wilson Wolf , Теперь мы можем легко вырастить достаточное количество этих клеток для терапевтических целей.Насос GatheRex, который мы запрашиваем, является единственной системой, совместимой с колбами для культивирования Grex и позволяющей концентрировать и собирать клетки T- в конце культивирования. Wilson Wolf — единственная известная система, которая может обеспечить это качество ячеек для нашего сотового производства.
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Настольный
Ячейка СортировщикТип: Уведомление о торгах
Срок: 02 июня 2021 г. (1 месяц назад)
Размещено: 2 месяца назадНачато: 25 мая, 2021 (2 месяца назад)
(v) Это требование касается следующих : Номер 122561; WOLF G2 Сортировщик ячеек , 2 лазера, 488 нм и 561 нм; Кол-во 1 Арт. № 120246; Компьютер с конфигурацией AIO с программой просмотра WOLF ; Кол-во 1 Арт. № 150411; WOLF Микрожидкостный сортировочный картридж, одинарная ячейка , упаковка из 10 шт .; Кол-во 1 Арт. № 170123; Бисер, Радуга, 8 пик; Кол-во 1 Арт. № 170111; Бусины, Калибровка, Капельница; Кол-во 1 Арт. № 310046; Комплект, аксессуары, WOLF ; Кол-во 1 Арт. № 120010; Программное обеспечение, Wolf Viewer, Ver 2.4
От: Федеральное правительство (Федеральное правительство)
Код продукта | H-4DCA | |
---|---|---|
Описание продукта | Предохранительный ручной фонарь, с питанием от первичной ячейки | |
Код (ATEX и IECEx) | II 2GD Ex eb ib IIC T4 Gb Ex tb IIIC T135 ° C Db IP66 | |
Тип защиты | «eb» повышенная безопасность, «ib» искробезопасность, «tb» защита корпусом | |
Область классификации (газы) | Зоны 1 и 2, группы газов IIA, IIB и IIC | |
Темп.Классификация (газы) | Т4 | |
Зона классификации (пыль) | Зоны 21 и 22 | |
Макс. Температура поверхности (пыль) | 135 ° С | |
Температура окружающей среды | от -10 ° C до + 40 ° C | |
Свидетельство | ATEX BAS00ATEX2176X / IECEx BAS 16.0076X | |
Корпус | Термопласт, антистатический | |
Линза | Закаленное стекло (6 мм) | |
Тип балки | Пятно | |
Источник света | Номер детали | Только H-141 |
Тип | Галогенная лампа накаливания | |
Вольт | 4-8В | |
Ватт (ампер) | 2.4 Вт (0,5 А) | |
Выход | 37лм (при номинальном напряжении) | |
Жизнь | 20 часов (при номинальном напряжении) | |
Источник питания | Номер детали | 4 x H-20 (LR20) |
Тип | Первичные элементыLR20 / R20 согласно IEC60086 | |
Вольт | 4 x 1,5 В | |
Продолжительность света | До 20 часов | |
Пылевлагозащита | IP66 согласно EN60529: 1992 | |
Масса | 1. |