Series «Olya Rainbow» УЗОРЫ КОСИЧКИ по клеточкам для ЛД Ч.1 (ЛИЧНОГО ДНЕВНИКА)
Select the convenient viewing option and quality
matching your screen
There was a problem playing this video. |
Channel is not available details |
You are watching
Браслет ИСПАНСКОЕ КРУЖЕВО из резинок на рогатке bracelet rainbow loom bands
You are watching
ДЕКОР СПИННЕРА РЕЗИНКАМИ spinner rainbow loom bands
You are watching
DIY СПИННЕР из резинок SPINNER Rainbow Loom bands Charm
You are watching
УЗОРЫ по клеточкам для ЛД Ч.

You are watching
АРБУЗНАЯ ДОЛЬКА фреска из резинок на станке | Watermelon rainbow loom charm
You are watching
КОТИК ФРЕСКА из резинок на станке | Cat Rainbow Loom Bands
You are watching
МИНЬОН ФРЕСКА из резинок на станке | Minion Rainbow Loom Bands
You are watching
ПРОСТЫЕ УЗОРЫ ПО КЛЕТОЧКАМ НА ПОЛЯХ ч4
You are watching
УЗОРЫ ПО КЛЕТОЧКАМ для ЛИЧНОГО ДНЕВНИКА ч.

You are watching
УЗОРЫ по клеточкам для ЛИЧНОГО ДНЕВНИКА Ч.2
You are watching
УЗОРЫ КОСИЧКИ по клеточкам для ЛД Ч.1 (ЛИЧНОГО ДНЕВНИКА)
You are watching
МОРКОВКА из резинок на крючке без станка | Carrot Rainbow Loom Hook Only
You are watching
СОВА фреска из резинок на станке | Owl Rainbow Loom Bands
You are watching
ПИАНИНО из резинок на станке by Olya Rainbow
You are watching
браслет ЧЕШУЯ ДРАКОНА из резинок на вилках без станка | Dragon Scale Bracelet Rainbow Loom
You are watching
ЯЩЕРИЦА из резинок на рогатке.

You are watching
DIY СПИННЕР своими руками и БЕЗ ПОДШИПНИКА! | DIY Fidget Spinner Without A Bearing
You are watching
СУМКА для куклы из резинок от подписчицы Настены Артамоновой
You are watching
ЯБЛОКО из резинок на крючке. Фигурка из резинок | Apple Rainbow Loom Bands Hook Only
You are watching
БРАСЛЕТ из резинок на рогатке БУТОН без станка | Bracelet Rainbow loom
- Description
- 7 reviews
Последние новости туризма на сегодня 2022
Отдых и Туризм — Новости туризма 2022
Февраль 12, 2022 8 комментариев
С чем у любого туриста ассоциируется Хорватия? В первую очередь — отличная экология, чистейшее лазурного цвета Адриатическое море и невероятно живописные берега.
Февраль 1, 2022
Февраль 1, 2022
Февраль 1, 2022
Февраль 2, 2022
Правильное питание
Ноябрь 19, 2022 5 комментариев
Хотя общая идея заключается в том, что замороженные фрукты не несут никакой пользы для здоровья, многочисленные доказательства противоречат…
Ноябрь 19, 2022 10 комментариев
Ноябрь 19, 2022 20 комментариев
Общество
Ноябрь 19, 2022 7 комментариев
Найти идеальный подарок на Новый год для близких и друзей — непростая задача.
Ноябрь 19, 2022 20 комментариев
Ноябрь 19, 2022 4 комментария
Ноябрь 19, 2022 5 комментариев
Cпорт отдых туризм
Ноябрь 20, 2022 16 комментариев
Занять всю семью непросто. И что ж, нужно время, чтобы постоянно придумывать новые…
Бизнес
Ноябрь 20, 2022 2 комментария
Во французском языке существительное menu имеет два совершенно разных…
Спорт
Ноябрь 21, 2022 8 комментариев
Если вы все-таки решились на покупку первого сноуборда, при выборе однозначно не стоит…
Вязаная крючком шапка с косичками от Vendulkam Crochet
Цифровая схема вязания крючком классной, удобной для носки шапки с напуском. Отлично подходит для весенней прогулки 🙂 Вы или ваша маленькая девочка будете выглядеть потрясающе в этой шапочке.
Выкройка написана в 5 размерах от малыша до взрослого размера. Каждый размер отмечен своим цветом, поэтому текст будет легче читать. Шапку легко сделать, вы должны знать, как вязать крючком базовые и продвинутые петли, такие как передний столбик и задний столбик с накидом. Но не волнуйтесь, более сложные стежки описаны в схеме. Она написана стандартными американскими (США) терминами, на английском языке, 13 страниц пошаговой инструкции и множество картинок для успешного выполнения вашей работы. Выкройка доступна для мгновенной загрузки. После подтверждения оплаты вы сразу же получите ссылку для скачивания выкройки.
. . . . . . Это схема вязания крючком, а не готовая вещь. . . . . .
. . . . . . НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ИНСТРУМЕНТЫ. . . . . .
• тонкая пряжа/ спорт/ 5 нитей/ 12 сп/ требует крючок 3 мм
• крючок 3 мм
• 3 шт. пуговиц средние 31 мм
• гобеленовая игла и ножницы
. . . . . . ПРЯЖА. . . . . .
100% мерсеризованный хлопок Catania Solids by Schachenmayr SMC
Вес пряжи: Sport / 5 ply (12 wpi), метраж: 136 ярдов (124 метра), вес единицы товара: 50 грамм (1,76 унции) Плотность: 26,0 петель = 4 дюйма
Используемый цвет: светло-розовый 222. (137 светло-бирюзовый для синей шляпы). Общее количество пряжи будет зависеть от размера вашей шапки. Для шапки с периметром головы 52 см (20,5 дюймов). Общее количество пряжи составляет 70 г – 120 г / 120 – 326 ярдов. Это зависит от размера шапки.
★ Вы можете купить эту пряжу здесь:coloryarnshop.etsy.com
. . . . . . РАЗМЕРЫ . . . . . .
Данная выкройка шапки включает 5 размеров:
4 года — 50 см — (окружность головы 19,7 дюймов)
5/6 лет — 51 см — (окружность головы 20 дюймов)
7/9 лет — 52 см — (окружность головы 20,5 дюймов)
10/11 лет — 53 см — (окружность голова 20,9 дюйма)
12 лет — взрослый — 54 см — (окружность головы 21,3 дюйма)
. . . . . . УРОВЕНЬ ШАБЛОНА. . . . . .
Средний уровень
Вы должны знать, как вязать: Воздушная петля (ВП), Сбн (ССн), Столбик без накида (СБН), Столбик с накидом (ССН), Прибавка (прибавка): 2 петли в одну петлю, столбик переда и спинка столбик с накидом (они объясняются в схеме
НАСЛАЖДАЙТЕСЬ ЭТОЙ ВЫКРОЙКОЙ 🙂 Если вам понадобится моя помощь с выкройкой — не стесняйтесь и пишите на Etsy или по электронной почте.
. . . . . . СКИДКИ. . . . . .
Большое спасибо за интерес к моим выкройкам. Купите больше выкроек на © vendulcam.etsy.com и сэкономьте. Вот коды скидок для вас:
★ Закажите до $11 — введите код купона SAVE10VENDULKAM, завершив свой заказ, и получите скидку 10% на ваш заказ.
★ Закажите до $30 — введите код купона SAVE15VENDULKAM, завершив свой заказ, и получите скидку 15% на ваш заказ.
★ Закажите до 50 долларов — введите код купона SAVE20VENDULKAM, завершив свой заказ, и получите скидку 20% на свой заказ.
Примечание: Скидка распространяется на цену БЕЗ налогов
. . . . . . АВТОРСКИЕ ПРАВА . . . . . .
Спасибо, что заглянули © vendulkam.etsy.com 2011-2018. Все права защищены. Все изображения и рисунки, включая название и описание этого узора, являются интеллектуальной собственностью VendulkaM.etsy.com/Vendula Maderska. Выкройка предназначена только для личного использования. Выкройка или ее части не могут быть воспроизведены, распространены, перепроданы, переведены, опубликованы (в Интернете или в печати), изменены, переданы или опубликованы (для продажи или бесплатно) в Интернете или офлайн!
Вам разрешено продавать готовые изделия по моей выкройке — в ограниченной серии и ручной работы. Пожалуйста, укажите ссылку или ссылку на мой магазин и напишите: на основе выкройки VendulkaM или #vendulkamppattern в соц. Спасибо!
Спасибо!
Ваш,
Вендулка
Клетки печени, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток макак-косичек, поддерживают инфекцию, вызванную вирусом гепатита С
- Список журналов
- Рукописи авторов HHS
- PMC3805793
Являясь библиотекой, NLM предоставляет доступ к научной литературе. Включение в базу данных NLM не означает одобрения или согласия с
содержание NLM или Национальных институтов здравоохранения.
Узнайте больше о нашем отказе от ответственности.
Гастроэнтерология. Авторская рукопись; доступно в PMC 2014 1 ноября.
Опубликовано в окончательной редакции как:
Гастроэнтерология. 2013 ноябрь; 145(5): 966–969.e7.
Опубликовано в сети 25 июля 2013 г. doi: 10.1053/j.gastro.2013.07.026
PMCID: PMC3805793
NIHMSID: NIHMS510954
PMID : 23891978
, 1 , * , 2 , * , 1 , 3 , 3, 4, 5 , 2, ** и 1, **
Информация об авторе Информация об авторских правах и лицензии Отказ от ответственности
- Дополнение Материалы
Узковидовая тропность вируса гепатита С (ВГС) ограничивает исследования на животных. Мы обнаружили, что клетки печени макаки косички ( Macaca nemestrina ), полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, поддерживают весь жизненный цикл ВГС, хотя эффективность инфекции была ограничена дефектами в процессе проникновения клеток ВГС. Этот блок был преодолен путем либо увеличения экспрессии окклюдина, комплементации клеток человеческим CD81, либо инфицирования их штаммом HCV с менее ограниченной потребностью в CD81. Используя эту систему, мы можем изменить генетику вируса и клетки-хозяина, чтобы сделать макак с косичками подходящей, клинически значимой моделью для изучения инфекции ВГС.
Ключевые слова: животная модель, обезьяна, вирус гепатита С, репликация
Вирус гепатита С (ВГС) является причиной более половины всех случаев рака печени и большинства трансплантаций печени во всем мире 1 . Вакцины против ВГС не существует, а лечение часто бывает неэффективным и осложняется побочными эффектами и устойчивостью вируса 2 . Известно, что ВГС естественным образом заражает только людей и шимпанзе (рассмотрено в 3 ). Из-за моратория на исследования шимпанзе и связанных с этим этических и финансовых проблем для изучения ВГС 9 необходима альтернативная животная модель.0069 in vivo патогенеза и репликации, а также для разработки противовирусных препаратов и вакцин. Здесь мы стремились определить, поддерживают ли гепатоцитоподобные (MnHep) клетки, полученные из косичного макака ( Macaca nemestrina, Mn), репликацию ВГС, с конечной целью разработки иммунокомпетентной животной модели ВГС приматов, отличных от человека.
Несколько групп недавно показали, что индуцированные человеком плюрипотентные и эмбриональные стволовые клетки могут дифференцироваться в клетки печени, поддерживающие инфекцию ВГС 4–7 . Мы использовали аналогичный подход для дифференциации клеток MnHep от индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (MniPSC) 8 (дополнительная фигура 1). Чтобы проверить их способность поддерживать инфекцию HCV, клетки MnHep и Huh-7.5 подвергали заражению инфекционным HCV, полученным в клеточной культуре (HCVcc; системы культивирования клеток HCV, рассмотренные в 9). Клетки MnHep поддерживали инфекцию и репликацию HCVcc, о чем свидетельствовали увеличение внутриклеточной РНК HCV с течением времени и окрашивание клеток гликопротеина HCV E2, оба из которых ингибировались ингибитором полимеразы HCV 2’C-метил-аденозином (2’CMA) 10 (). Однако этот процесс оказался неэффективным, так как уровни РНК ВГС в клетках MnHep были в 13,1 раза ниже, чем уровни, наблюдаемые в клетках Huh-7,5 человека положительного контроля. Следует отметить, что даже приближение к уровням инфицирования вирусом гепатита С Huh-7,5 является достижением, поскольку большинство систем с первичными культурами клеток допускают инфекции, которые значительно менее эффективны. Мы считаем, что клетки печени, полученные из стволовых клеток, просто лучше подходят для репликации ВГС, чем культивируемые первичные клетки.
Действительно, мы недавно показали, что клетки печени, полученные из стволовых клеток человека, поддерживают инфекцию HCV с такой же эффективностью, как и клетки Huh-7.5 11 . Инфицированные ВГС клетки Huh-7.5 и MnHep секретировали пропорциональные количества РНК ВГС (), которые, как было показано, связаны с инфекционным вирусом на клетках Huh-7.5 (), а количество РНК ВГС, секретируемое клетками Huh-7.5 и MnHep, было пропорционально количество инфекционного вируса в последующих экспериментах по заражению. Таким образом, в то время как клетки MnHep поддерживают инфекцию HCV, по крайней мере один этап жизненного цикла вируса может быть неэффективным в этих клетках.
Открыть в отдельном окне
Клетки MnHep поддерживают инфекцию ВГС
Для оценки их способности поддерживать инфекцию ВГС клетки Huh7.5 и MnHep подвергали заражению ВГС дикого типа, который не кодирует репортерный ген. В указанное время после трансфекции (A) внутриклеточную и (B) внеклеточную РНК количественно определяли с помощью qRT-PCR. 2’CMA, ингибитор полимеразы ВГС, был включен в параллельные инфекции, чтобы продемонстрировать уровни РНК, независимые от репликации. Значения представляют собой количество копий РНК ВГС, определенное относительно стандартной кривой в зависимости от количества общей РНК для внутриклеточных образцов или объема супернатанта для внеклеточных образцов. (С) В 9Через 6 часов после инфицирования (h.p.i.) ложные или зараженные ВГС клетки, с 2’CMA или без него, подвергали иммуноокрашиванию на гликопротеин Е2 ВГС (красный) и контрастное окрашивание по Hoechst (синий). (D) Инфекционный ВГС в супернатантах, собранных при 48 л.с. определяли количественно с помощью анализа предельного разведения на клетках Huh-7.5 и выражали как инфекционную дозу 50% тканевой культуры на мл (TCID50/мл). Средние значения и стандартные отклонения трех независимых экспериментов, каждый из которых проводился в трех повторностях. *** P<0,001 (критерий Манна-Уитни)
Внедрение клеток ВГС является одной из стадий жизненного цикла вируса, влияющей как на тканевой, так и на видовой тропизм инфекции ВГС 12 . Чтобы специально проверить их способность поддерживать проникновение клеток HCV, клетки MnHep и Huh-7.5 подвергали заражению лентивирусными частицами, несущими гликопротеины оболочки HCV (HCVpp), которые кодируют люциферазу Gaussia (GLuc) (рассмотрено в 9). После нормализации до параллельных инфекций VSVGpp для контроля незначительных различий в количестве клеток, MnHep (экспрессирующие только GFP в качестве отрицательного контроля) были в 7,9 раза менее инфицируемыми, чем клетки Huh-7,5 (). Важно отметить, что уровень проникновения в клетки MnHep зависел от подлинной функции гликопротеина ВГС, поскольку инфекция ингибировалась антителом, нейтрализующим гликопротеин Е2 ВГС 13 .
Открыто в отдельном окне
Клеточные и вирусные детерминанты способности клеток MnHep проникать в ВГС
Клетки MnHep, трансдуцированные для экспрессии только GFP, в качестве отрицательного контроля, или указанные факторы проникновения клеток ВГС подвергались заражению GLuc, экспрессирующим (A) HCVpp или (B) ВГСcc. Инфекции проводили параллельно с нейтрализующим антителом против ВГС (анти-Е2). Значения GLuc были измерены при 48 л.с. для HCVpp или указанные времена для HCVcc, нормализованные к параллельным инфекциям VSVGpp и установленные относительно инфекции клеток Huh-7.5 с высокой пермиссивностью. Три независимых эксперимента, каждый из которых выполнен с шестью повторами, и статистические данные относятся только к GFP. Наивные клетки Huh-7.5 и MnHep подвергали заражению мышиным CD81-адаптированным HCVcc, и (C) уровни внутриклеточной и (D) внеклеточной РНК HCV анализировали, как описано выше. Три независимых эксперимента, каждый из которых выполнен в трех повторностях. *** P<0,001 (критерий Манна-Уитни)
Из многих клеточных факторов, необходимых для проникновения клеток ВГС, четыре влияют на тропизм ВГС (рассмотрено в 14 ). Паттерны экспрессии типов клеток рецептора-мусорщика класса B типа I (SR-BI) и клаудина-1 (CLDN1) влияют на тропность этого процесса к тканям, в то время как различия в последовательностях CD81 и окклюдина (OCLN) влияют на тропизм видов. Все четыре из этих факторов были выражены в клетках MnHep (дополнительная фигура 2A-C). Сверхэкспрессия человеческих версий SR-BI и CLDN1 в этих клетках (контролируемая с помощью иммуноблота, дополнительная фигура 2E) не усиливала инфицирование HCVpp () или HCVcc (). Таким образом, Mn и человеческие версии этих белков были одинаково функциональны и присутствовали на уровне насыщения. Сверхэкспрессия OCLN человека или Mn усиливала инфицирование репортером GLuc, экспрессирующим HCVpp и HCVcc (), что указывало на то, что уровни MnHep OCLN ограничивали проникновение HCV. Неудивительно, что белки OCLN обоих видов функционировали одинаково хорошо, поскольку последовательности, ранее определенные как критические для этой активности, схожи (дополнительная фигура 4A), и обе версии одинаково функционировали в клетках человека 786-O с дефицитом OCLN (дополнительная фигура 4B). . Сверхэкспрессия CD81 человека, но не Mn, усиливала инфекцию HCVpp и HCVcc в большей степени, чем избыточная экспрессия OCLN (14).
Mn-версия CD81 идентична ортологу африканской зеленой мартышки (дополнительная фигура 5A), которая, как ранее было показано, демонстрирует 25% функции человеческого белка 9.0083 15 , и что мы подтвердили в клетках HepG2 человека (дополнительная фигура 5B). Котрансдукция человеческого, но не Mn CD81, с любой из версий OCLN еще больше усилила инфекцию HCVpp и HCVcc (2). Таким образом, неэффективное проникновение клеток MnHep HCV, вызванное низкими уровнями экспрессии OCLN и субоптимальной активностью предела Mn CD81, можно преодолеть с помощью генетических манипуляций с этими клетками.
Bitzegeio et al. недавно идентифицировали мутантный HCVcc, который эффективно использует белки CD81 как человека, так и мыши 16 . Этот вирус инфицировал клетки MnHep только в 3,9 раза менее эффективно, чем клетки Huh-7,5 (1), и эти клетки высвобождали пропорциональные уровни РНК ВГС (1). Таким образом, на основании наших данных о том, что HCVcc дикого типа инфицирует клетки MnHep в 13,1 раза менее эффективно, чем клетки Huh-7,5, адаптированный к CD81 вирус мыши инфицирует клетки MnHep в 3,4 раза лучше, чем HCVcc дикого типа ( P <0,001). Эти результаты показывают, что низкие уровни проникновения HCV, наблюдаемые в клетках MnHep, могут быть преодолены за счет генетической вирусной адаптации.
Таким образом, мы показываем, что клетки печени, полученные из MniPSCs, поддерживают инфекцию HCV, которая дополнительно усиливалась модификациями как вирусных, так и клеточных белков. Это важное открытие ставит под сомнение историческое предположение о том, что только клетки человека и шимпанзе восприимчивы к ВГС. Действительно, в предыдущем исследовании не удалось продемонстрировать инфекцию ВГС у макак-резусов 17 . Возможно, что описанной выше блокировки входа было достаточно для предотвращения заражения в этом исследовании. Также возможно, что особенно сильная кинетика репликации штамма JFH-1, использованного в нашем исследовании, требовалась для наблюдаемого заражения клеток макак. Тем не менее, наше исследование предполагает, что макака с косичками действительно может быть подходящей моделью для изучения инфекции ВГС. Учитывая нынешнее ограничение исследований шимпанзе, разработка альтернативной клинически значимой модели, отличной от человека, имеет решающее значение для in vivo тестирование новых методов лечения ВГС. Наша система предоставляет платформу для изучения взаимодействий ВГС-хозяин, которые влияют на эффективность заражения ВГС этих клеток, что должно привести к созданию более податливых моделей животных, отличных от человека.
01
Нажмите здесь для просмотра. (2.5M, pdf)
Поддержка грантов:
M.S. была поддержана докторской стипендией Робина Чемерса Нойстейна. Х.П.К. является исследователем молекулярной медицины Марки и лауреатом премии Хосе Каррераса/Э.Д. Thomas Chair for Cancer Research и гранты NIH R01 HL098489 и P51 RR00016. VGE была поддержана Институтом стволовых клеток черной семьи при Медицинской школе Икана на горе Синай. М.Дж.Э. был поддержан грантами NIH R01 DK095125, R00 AI077800 и R56 AI091792, грантом научного исследователя Американского онкологического общества (RSG-12-176-01-MPC) и благотворительным фондом Pew (MJE).
Раскрытие информации: нет
Помощь в написании: нет
Вклад авторов:
М.С., О.Г., Дж.Л.Г., Х.П.К., В.Г.Е. и М.Э. разработали исследование и эксперименты. М.С., О.Г. и В.Е. полученные и проанализированные данные. В.Г.Е. и ME составили рукопись, которую все авторы критически рассмотрели.
Отказ от ответственности издателя: Это PDF-файл неотредактированной рукописи, которая была принята к публикации. В качестве услуги нашим клиентам мы предоставляем эту раннюю версию рукописи. Рукопись будет подвергнута редактированию, набору текста и рецензированию полученного доказательства, прежде чем она будет опубликована в ее окончательной цитируемой форме. Обратите внимание, что в процессе производства могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержание, и все правовые оговорки, применимые к журналу, относятся к нему.
1. Браун Р.С., мл. Природа. 2005; 436: 973–78. [PubMed] [Google Scholar]
2. Marks KM, et al. Антивир Тер. 2012;17:1119–31. [PubMed] [Google Scholar]
3. Бух Ж. Гастроэнтерология. 2012; 142:1279–1287. е3. [PubMed] [Google Scholar]
4. Roelandt P, et al. J Гепатол. 2012; 57: 246–51. [PubMed] [Google Scholar]
5. Schwartz RE, et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012;109:2544–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
6. Wu X, et al. PLoS Патог. 2012;8:e1002617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
7. Yoshida T, et al. Biochem Biophys Res Commun. 2011; 416:119–24. [PubMed] [Google Scholar]
8. Zhong B, et al. Стволовые клетки Dev. 2011;20:795–807. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
9. Vieyres G, et al. Методы. 2013;59:233–248. [PubMed] [Google Scholar]
10. Carroll SS, et al. Дж. Биол. Хим. 2003; 278:11979–84. [PubMed] [Google Scholar]
11. Goldman O, et al. Клеточная стволовая клетка. 2013;12:748–60. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
12.